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上海研谨生物
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500ml
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文献和实验DNA—— -20℃—— -70℃低温保存。 B 直接加入10µ RNase-A(10mg/ml)后冷冻保存。 试剂 配方 1M Tris-HCl ( pH7.4, 7.6, 8.0 ) pH 浓HCl Tris 去离子水 7.4 约70ml 121.1g
,也可煮沸一小时不经冰箱过夜。 3、 用纱布和脱脂棉过滤,除去肉渣,即成肉浸汁。加入1%蛋白胨及0.5%氯化钠,加热溶解并用蒸馏水补足蒸发失去的水分。 4、待冷至50℃左右时,调该溶液的pH至7.4~7.6。校正pH的方法为:①取三支与标准比色管(pH7.6)相同的空比色管,其中一管内盛放蒸馏水5ml;另外两管各加入欲测的肉汤培养基5ml,其中一管内加0.02%酚红指示剂0.25ml(滴定管),摇匀。②按图2所示排列,举起比色架,对光观察。若滴定管色调较淡或为黄色,即表示培养基偏
树突状细胞培养操作步骤 准备补充剂 将补充剂混合物在 15~25℃ 解冻。在无菌条件下用移液枪小心地将补充剂混合物混匀。然后,把补充剂混合物全部加到基础培养基中。盖上瓶子,轻轻混匀直到形成均一的混合物。DC生成培养基所附带的相应的细胞因子组合包含有成分A和B,它们都是以100X 的原液状态运输的。 注意:此时不要将化合物B加入培养基中。 DC基础培养基不带细胞因子,因此使用时必须另外自行添加。 新鲜分离的单核 DC 细胞的传代 对于新鲜分离自外
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