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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输和保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
Inclusion Body Protein Solubilization & Refolding Pack
- 库存:
大量
- 供应商:
上海沪震实业有限公司
- 规格:
100次盒
包涵体蛋白溶解及复性套装产品及特点
用E.coli 作为宿主表达得到的重组蛋白往往会形成包涵体,其中的重组蛋白质只完成部分折叠,还没形成最后的正确空间结构,所以没有生物活性,要得到有活性的重组蛋白,还需要后续的溶解和复性(重折叠)处理。目前最常用的溶解包涵体的方法是用尿素,Sarkosyl,盐酸胍等强变性剂,其缺点是包涵体中的重组蛋白质被彻底变性,使后续的蛋白质复性处理效率降低。本产品根据包涵体中的重组蛋白质已经完成了部分折叠这一实事设计,具有下列特点:
包涵体蛋白溶解及复性套装1. 一站式,提供包涵体洗涤、溶解和蛋白质复性的所有试剂。
2. 采用温和法溶解包涵体,释放的包涵体蛋白质不彻底变性,还能保持其部分折叠的结构,使后续的复性处理效率提高。
3. 所用复性液基于稀释复性,经过精心优化,有利于大部分蛋白的复性。
4. 还提供五种不同的添加剂,它们可以单独加入复性液,也可以按一定比例进行自由组合,以适应不同的蛋白质折叠需求。
5. 本试剂盒提供实惠的小规格,用于做预实验用,用户如果选择到合适的溶液组合后,可以单独购买其中的溶液以用于大量制备。
6. 本试剂盒足够100次小规模(1 mL规模)的蛋白质复性实验。
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文献和实验概要 对于基因工程技术构建的重组蛋白,通常分为可溶性重组蛋白和不溶性重组蛋白,可溶性的重组蛋白一般常常存在于细胞质内、细胞分泌到培养基、分泌到周质间隙中等。不可溶性的蛋白主要是由于表达系统的高效表达,在细胞内形成了包涵体。E.coli是应用最为广泛的重组蛋白质表达系统,但是表达的外源性蛋白多以包涵体的形式存在,为了重新获得生物活性,需要对包涵体蛋白质进行体外变复性操作。 蛋白质复性模型 根据对蛋白质折叠过程的研究,目前科学家已提出多种蛋白质复性模型,折叠漏斗模型是目前被广泛认可
蛋白的复性是一个世界性的难题,没有通用的方法,甚至没有靠得住的规律,只能试。 可以参考以下文章。该文出处已经忘了,如果有人知道原创作者或网上出处,请补充。 包涵体表达的蛋白的复性包涵体表达的蛋白的复性 包涵体: 包涵体是指细菌表达的蛋白在细胞内凝集,形成无活性的固体颗粒。 包涵体的组成与特性: 一般含有50%以上的重组蛋白,其余为核糖体元件、RNA聚合酶、外膜蛋白ompC、ompF和ompA等,环状或缺口的质粒DNA,以及脂体、脂多糖等,大小为0.5-1um,难溶
相关专题 关于包涵体的纯化是一个令人头疼的问题,包涵体的复性已经成为生物制药的瓶颈,关于包涵体的处理一般包括这么几步:菌体的破碎、包涵体的洗涤、溶解、复性以及纯化,内容比较庞杂 一、菌体的裂解 1、怎样裂解细菌 ? 细胞的破碎方法 1.高速组织捣碎:将材料配成稀糊状液,放置于筒内约1/3体积,盖紧筒盖,将调速器先拨至最慢处,开动开关后,逐步加速至所需速度。此法适用于动物内脏组织、植物 肉质种子
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