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Tuner(DE3)pLysS感受态细胞

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  • ATCC
  • 美国
  • 2025年07月13日
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    • 保质期

      1年

    • 英文名

      Tuner(DE3)pLysS

    • 库存

      20

    • 供应商

      康朗生物

    • 规格

      500ul甘油菌

    Tuner(DE3)pLysS感受态细胞
    基本信息
    出品公司: ATCC
    菌株类型: E.coli
    培养基: LB培养基
    生长条件: 37 ℃,  有氧
    基因型: Tuner(DE3)pLysS菌株基因型
    抗性: 氯霉素
    质粒转化条件: 42 ℃热激
    应用: 蛋白表达
    诱导方法: IPTG

    订购信息

    产品编号 产品名称 规格 价格
    AT2008 Tuner(DE3)pLysS

    500ul甘油菌

    ¥1000.00

    菌株特点

    Tuner系列菌株是LacZY去除的BL21突变菌株,这可以通过细胞培养来调节蛋白表达水平。lac通透酶(lacY)突变使得IPTG能够进入所有的细胞菌内。

    不像乳糖或者阿拉伯糖,IPTG是一个可以通过lac通透酶途径进入细胞内的诱导剂。这使得菌株可以使得IPTG的蛋白诱导具有IPTG的浓度依赖性。与 pET系列载体联合使用,可以使得蛋白表达从低表达水平到超高表达水平进行有效调节。蛋白表达水平低的情况下,目的蛋白可能会具有更好的可溶性和生理活 性。

    Tuner系列菌株的蛋白表达水平可以通过IPTG浓度进行精确的调节,具有严格的浓度依赖性。

    Tuner系列菌株还是lon和ompT蛋白酶缺陷型菌株。

    DE3是溶源性的 λDE3, 所以在lacUV5启动子下携带有T7 RNA聚合酶的染色体拷贝。该菌株适用于pET系列载体,及其他T7启动子系列载体。

    含有pLSs质粒,pLySs质粒能够产生T7溶菌酶,可以有效降低目的基因的基础表达水平。pLySs质粒使得该菌株具有氯霉素抗性。pLySs质粒的起始复制位点是p15 Origin, 这使得该质粒能够和pUC-及pBR322-衍生的质粒互相共存。

    菌种培养及打管说明:
    1、安瓿瓶开封:用浸过75%酒精的脱脂棉擦净安瓿管,用火焰加热其顶端,滴少量无菌水至加热顶端使之破裂,用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端。
    2、菌株恢复培养:用无菌吸管吸取0.3--0.5ml适宜的液体培养基,滴入安瓿管内,轻轻振荡,使冻干菌体溶解呈悬浮状。吸取全部菌体悬浮液,移植于1-2支建议的培养基试管中,并在建议的条件下培养。
    3、注意事项:菌种活化前,请将安瓿管保存在6-10℃的环境下,某些菌种经过冷冻干燥保存后,延迟期较长,需要连续两次继代培养才能正常生长
    4、复苏后的菌种在传1-2代后使用。
    5、暂不启开的安瓿及复苏后需保藏的斜面应于4℃中保藏。
    特别注意事项:
    l、微生物菌种应保藏于低温、清洁和干燥的地方,室温放置时问过长会导致菌种衰退;
    2、菌种操作应在无菌条件下进行,防止杂菌污染:
    3、斜面菌种保藏时间通常为1-2个月,应根据菌种状况及时转接;冻干菌种保藏时间通常为5~10年;
    4、菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降,应及时与我司销售联系或更换新的菌种。

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    相关实验
    • 各种感受态细胞的区别、用途和特征

      )ply菌株 基因型: F- ompT gal dcm lon hsdSB(rB- mB-) λ(DE3pLysS(cmR). 特点: 该菌株带有pLysS,具有氯霉素抗性.此质粒还有表达T7溶菌酶的基因,T7溶菌酶能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰IPTG诱导的表达. 适合于毒性蛋白和非毒性蛋白的表达. 用途: 蛋白质表达.

    • 各种感受态细胞的区别 用途 特征

      ompT gal dcm lon hsdSB(rB- mB-) λ(DE3) pLysS(cmR)。 特点:该菌株带有pLysS,具有氯霉素抗性。此质粒还有表达T7溶菌酶的基因,T7溶菌酶能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰IPTG诱导的表达。 适合于毒性蛋白和非毒性蛋白的表达。 用途:蛋白质表达 DH5α菌株 基因型:F- endA1 glnV44 thi-1 recA1 relA1 gyrA96

    • 如何阅读质粒图谱

      由它们的天然启动子驱动。在 Rosetta ( DE3pLysS 和 Rosetta ( DE3 ) pLacI 中,稀有 tRNA 基因存在于分别带有 T7 溶菌酶和 lac 阻遏基因的同一质粒上。 Tuner 菌株为 BL21 的 lacZY 缺失突变株,能够调整培养物中所有细胞的蛋白表达水平。 lac 通透酶( lacY )突变使得 IPTG 均匀进入群体所有细胞,从而具有浓度依赖、水平均一的诱导表达。通过调整 IPTG 浓度,表达可从极低水平调节到极强、完全诱导的表达水平(通常

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