- ¥1000
- ATCC
- 美国
- AT2014
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
1年
- 英文名：
Rosetta-gami B(DE3)pLacI
- 库存：
20
- 供应商：
康朗生物
- 规格：
500ul甘油菌
基本信息
| 出品公司: | ATCC |
|---|---|
| 菌株类型: | E.coli |
| 培养基: | LB培养基 |
| 生长条件: | 37 ℃, 有氧 |
| 基因型: |  |
| 抗性: | 氯霉素，卡那霉素，四环素 |
| 质粒转化条件: | 42 ℃热激 |
| 应用: | 蛋白表达 |
| 诱导方法: | IPTG |
订购信息
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
|---|---|---|---|
| AT2014 | Rosetta-gami B(DE3)pLacI | 500ul甘油菌 |
¥1000.00 |
菌株特点
Rosetta-gami B系列菌株来源于Origami B系列菌株，是集合了BL21系列，Rosetta系列菌株和Origami系列菌株的优点，极大的增强了细胞内二硫键的形成和含有在大肠杆菌中稀有密码子的真核细胞蛋白的表达能力。
Rosetta-gami B(DE3)系列菌株是来源于Origami B系列菌株，携带有TrxB和Gor基因突变，提高含二硫键正确折叠 蛋白的高效表达。
本菌株含有pRARE质粒，能够提供原Rosetta(DE3)宿主菌含有 的AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, 和GGA六个稀有密码子的tRNA外，增加了真核细胞的在大肠杆菌中的蛋白表达水平。
在thioredoxin reductase (trxB)和glutathione reductase (gor)基因上同时含有突变，这使得该菌株能够更加高效的在细胞质内生成二硫键，有助于含二硫键蛋白的活性蛋白形成。
TrxB和Gor基因突变使得质粒能够分别具有卡那和四环素抗性，所以本菌株无法用于卡那和四环素抗性质粒的蛋白表达。
Rosetta-gami B(DE3)感受态细胞来源于含有BL21系列菌株中的lacZY基因突变，能够通过IPTG高效控制目的基因的表达。
DE3是溶源性的 λDE3, 所以带有T7 RNA聚合酶的染色体拷贝。该菌株适用于pET系列载体，及其他T7启动子系列载体。
Rosetta-gami B(DE3)感受态细胞能够用于氨苄抗性和壮观霉素抗性质粒的原核表达。
pLacI基因型表明该菌株含有pACYC184质粒，该质粒含有Lac抑制子基因。
1、安瓿瓶开封：用浸过75％酒精的脱脂棉擦净安瓿管，用火焰加热其顶端，滴少量无菌水至加热顶端使之破裂，用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端。
2、菌株恢复培养：用无菌吸管吸取0.3--0.5ml适宜的液体培养基，滴入安瓿管内，轻轻振荡，使冻干菌体溶解呈悬浮状。吸取全部菌体悬浮液，移植于1-2支建议的培养基试管中，并在建议的条件下培养。
3、注意事项：菌种活化前，请将安瓿管保存在6-10℃的环境下，某些菌种经过冷冻干燥保存后，延迟期较长，需要连续两次继代培养才能正常生长
4、复苏后的菌种在传1-2代后使用。
5、暂不启开的安瓿及复苏后需保藏的斜面应于4℃中保藏。
特别注意事项：
l、微生物菌种应保藏于低温、清洁和干燥的地方,室温放置时问过长会导致菌种衰退;
2、菌种操作应在无菌条件下进行,防止杂菌污染:
3、斜面菌种保藏时间通常为1-2个月,应根据菌种状况及时转接;冻干菌种保藏时间通常为5~10年;
4、菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降，应及时与我司销售联系或更换新的菌种。
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文献和实验for more than 20 hours at 37ºC. The enzyme b-lactamase is secreted into the medium from ampicillin-resistant transformants and can rapidly inactivate the antibiotic in regions surrounding the colonies. Thus, plating cells at high density or incubating them for long
改进方案 建议菌株 无蛋白表达 E. coli 的密码子偏移性 补充稀有密码子的tRNA；将稀有密码子突变为普通大肠杆菌密码子 Rosetta 2 Rosetta-gami 2 Rosetta-gami B RosettaBlue 出现截短蛋白 包涵体 二硫键形成困难 降低宿主胞质的还原性；利用促进二硫键形成的各种载体标签 Origami 2
子 Rosetta 2 Rosetta-gami 2 Rosetta-gami B RosettaBlue 出现截短蛋白 包涵体 二硫键形成困难 降低宿主胞质的还原性；利用促进二硫键形成的各种载体标签
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