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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
12个月
- 英文名:
Mouse source component (Mouse) nucleic acid test kit (PCR)
- 库存:
18
- 供应商:
上海康朗生物科技有限公司
- 规格:
盒
鼠源性成分(Mouse)核酸检测试剂盒(PCR法)反应需注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。
特点优势:
1. 特异性:
2. 重现性:
3. 灵敏性:
4. 实用性:
鼠源性成分(Mouse)核酸检测试剂盒(PCR法)性能指标:
1. 试剂盒检测特异性为100%
2. 检测试剂盒重现性为100%
3. 灵敏度可达到103/ml
4. 有效期为6个月
鼠源性成分(Mouse)核酸检测试剂盒(PCR法)反应五要素:参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以最低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
鼠源性成分(Mouse)核酸检测试剂盒(PCR法)相关PCR产品列表:
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蚕微粒子病PCR检测试剂盒 50T/100T 保存:-20 ℃, 保质期一年。
产肠毒素性大肠杆菌PCR检测试剂盒 50T/100T 保存:-20 ℃, 保质期一年。
产毒副溶血弧菌PCR试剂盒 50T/100T 保存:-20 ℃, 保质期一年。
产气荚膜梭菌C类磷脂酶基因(283bp)常规PCR检测试剂盒 50T/100T 保存:-20 ℃, 保质期一年。
产气荚膜梭菌PCR检测试剂盒 50T/100T 保存:-20 ℃, 保质期一年。
肠产毒性E.coli核酸检测试剂盒 50T/100T 保存:-20 ℃, 保质期一年。
肠道病毒EV70 PCR检测试剂盒 50T/100T 保存:-20 ℃, 保质期一年。
肠道病毒EV71 PCR检测试剂盒 50T/100T 保存:-20 ℃, 保质期一年。
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肠道病毒PCR检测试剂盒 50T/100T 保存:-20 ℃, 保质期一年。
肠道病毒通用型/EV71/柯萨奇病毒A16型3联PCR检测试剂盒 50T/100T 保存:-20 ℃, 保质期一年。
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文献和实验PCR法是20世纪80年代中期建立起来的一种体外DNA扩增技术,其基本原理是酶促DNA合成反应,即在DNA模板、引物和脱氧核糖核酸存在下,经DNA聚合酶的作用,使DNA 链扩增延伸。该方法具有灵敏度高、特异性强、快速的特点,但其对实验环境的要求严格,实验成本较高,有时还有假阳性的现象出现。 1、仪器设备 超净工作台、PCR仪、电泳仪、凝胶成像分析系统、台式离心机、旋涡混悬器等。 2、实验试剂 选用美国Stratagene公司生产的支原体检测试剂盒(内有引物、阳性
-6 )μg 二.人体细胞核酸理论含量 基因组DNA 6 pg/cell 总RNA 10-30 pg/cell 三.人全血DNA理论含量 5-10×10 6 细胞/ml Blood 30-60μg DNA/ml Blood 四.RNA理论含量 Cell
DNA的碱基序列决定着基因的特性,DNA序列分析(测序,sequencing)是分子生物学重要的基本技术。无论从基因库中筛选的癌基因或经PCR法扩增的基因,最终均需进行核酸序列分析,可藉以了解基因的精细结构,获得其限制性内切酶图谱,分析基因的突变及对功能的影响,帮助人工俣成基因、设计引物,以及研究肿瘤的分子发病机制等。测序是在高分辨率变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术的基础上建立起来的。目前最常用的方法有Maxam-Gilbert的化学降解少和Sanger的双脱氧法等,近年来已有DNA
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