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- KALANG
- 中国大陆
- KL-D9532
- 2025年07月15日
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- 文献和实验
- 技术资料
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-20℃
- 保质期：
长期
- 库存：
大量
- 供应商：
康朗生物
- 规格：
5KU|1KU
Lambda 核酸外切酶
规格：5KU|1KU特性:
高效 5´ →3´ 核酸外切酶活性
切下双链 DNA 的 5´ 单核苷酸
概述:
Lambda 核酸外切酶作用于双链 DNA，沿 5´→3´ 方向逐步切去 5´ 单核苷酸。最适底物是 5´ 磷酸化的双链 DNA，也能缓慢降解单链 DNA 和非磷酸化底物。该酶不能从 DNA 的切刻或缺口处起始消化。
来源:
E. coli 的 Lambda 核酸外切酶基因与编码麦芽糖结合蛋白（MBP）的基因融合表达。亲和层析后，从融合蛋白上切下 Lambda 核酸外切酶，并纯化除去 MBP。
反应条件:
1X Lambda 核酸外切酶反应缓冲液
[67 mM Glycine-KOH（pH 9.4 @ 25℃），2.5 mM MgCl2，50 μg/ml BSA]，37℃ 温育。
热失活:75℃ 加热 10 分钟。
质保声明:
Lambda 核酸外切酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。
单位定义:
1 单位指在 50 μl 反应体系中，37℃ 条件下，30 分钟内能从双链 DNA 底物上催化产生 10 nmol 酸溶性脱氧核糖核苷酸所需的酶量。
浓度:
5,000 units/ml。
注意事项:
5´ -0H 端的切割速度比 5´ -PO4 端慢 20 倍。单链 DNA 比双链 DNA 慢 100 倍。
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文献和实验在核酸水解酶中，是具有从分子链的末端顺次水解磷酸二酯键而生成单核苷酸作用的酶，与核酸内切酶相对应。可大致分为水解磷酸二酯键的 3′端生成 5′ -单核苷酸的酶，及水解 5′端生成 3′ -单核苷酸的酶。前者有蛇毒磷酸二酯酶及大肠杆菌核酸外切酶Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ等；后者有脾脏磷酸二酯酶、嗜酸乳杆菌（ Lac-tobacillus acidophilus）核酸酶。这些酶中还可以区别出从分子链的 3′末端或 5′末端开始切断和对单链 DNA或双链 DNA具有特异作用的酶。可利用这些酶水解
脾脏核酸外切酶spleen exonuclease，spleenphosphodiesterase
亦称脾脏磷酸二酯酶（spleen phosphodieste- rase）。系将具有 5′ -OH末端的 DNA和 RNA，从 5′末端向 3′方向不断使 3′ -核苷酸游离分解的酶。 EC3． 1． 16． 1。常从牛脾脏提纯的此种酶。高分子 DNA不易水解，但用 DNaseⅡ或普氏微球菌（ Micrococ-cus pyogenes）核酸酶处理，则可以完全水解。对碱基序列无特异性，但在 5′末端有磷酸单酯基则不水解。反应不需要 Mg2 ，但最适 pH在有 2× 10
实验原理核酸分子杂交是通过配对碱基对之间的非共价键（主要是氢键）结合，从而形成稳定的双链区。杂交分子的形成并不要求两条单链的碱基顺序完全互补，所以不同来源的核酸单链只要彼此之间有一定程度的互补顺序（即某种程度的同源性）就可以形成杂交双链。分子杂交可在 DNA 与 DNA、RNA 与 RNA 或 RNA 与 DNA 的二条单链之间进行。由于 DNA 一般都以双链形式存在，因此在进行分子杂交时，应先将双链 DNA 分子解聚成为单链，这一过程称为变性，一般通过加热或提高 pH 值来实现。用分子
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