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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温
- 保质期:
三年
- 英文名:
pHIL-D2
- 库存:
现货
- 供应商:
上海盖宁生物
| 质粒类型: | 酵母表达载体 |
|---|---|
| 表达水平: | 高拷贝 |
| 启动子: | AOX1 |
| 克隆方法: | 多克隆位点,限制性内切酶 |
| 载体大小: | 8210 bp |
| 5' 测序引物及序列: | 5´ AOX1:5´-GACTGGTTCCAATTGACAAGC-3´; |
| 3' 测序引物及序列: | 3´ AOX1:5´-GCAAATGGCATTCTGACATCC-3´ |
| 载体抗性: | Ampicillin (氨苄青霉素) |
| 筛选标记: | HIS4 |
订购信息
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
|---|---|---|---|
| 1988 | pHIL-D2 | 5ug质粒 |
¥1000.00 |
质粒图谱
PubMed=3413074; DOI=10.1073/pnas.85.16.6042
Pereira-Smith O.M., Smith J.R.
Genetic analysis of indefinite division in human cells: identification of four complementation groups.
Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 85:6042-6046(1988)
PubMed=2388294; DOI=10.1093/jnci/82.17.1420
McLemore T.L., Litterst C.L., Coudert B.P., Liu M.C., Hubbard W.C., Adelberg S., Czerwinski M.J., McMahon N.A., Eggleston J.C., Boyd M.R.
Metabolic activation of 4-ipomeanol in human lung, primary pulmonary carcinomas, and established human pulmonary carcinoma cell lines.
J. Natl. Cancer Inst. 82:1420-1426(1990)
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文献和实验*发表【中文论文】请标注:由上海盖宁生物科技有限公司提供;
*发表【英文论文】请标注:From Shanghai Gaining Biotechnology Co., Ltd.
体质粒,所以一般用整合型载体作为外源基因的表达载体,目前常用的表达载体多是美国Invitrogen公司开发构建的。P.pastoris既有分泌表达型的,又有胞内表达型的。常用的表达载体主要有:pPIC9,pPIC9K,pHILS,pAO815,pHILD2和pPICz等,其中pPIC9,pPIC9K和pHILS为分泌型表达载体,而pAO815,pHILD2和pPICz为胞内型表达载体,不同载体除具有各自特殊的基因组件外,还具有一些共同的序列,如这些载体都包括一个表达盒(cassette)和一
【转帖】教你一种简单、高效的提高重组蛋白质的诱导表达量的方法
。 实验步骤: 1.设计目的重组蛋白质的N端10-15个氨基酸的简并序列。 2.引物合成上述简并序列,同时设计合成目的基因反向引物。 3.PCR扩展目的基因,这样在目的基因的5‘端就引入了兼并序列,同时不改变氨基酸序列。 4.双酶切,插入到目标载体。 5.转化。 6.挑选多个克隆(比如100-200个)到1.5ml EP管,直接诱导表达(记得带上为改造克隆菌株的对照)。 7.SDS-PAGE检测。 8.挑选高表达的多个克隆,测序。 怎么样?是不是很简单,不需要做太多的摸索
的酿酒酵母的分泌信号—α交配因子(α-factor)引导序列已经成功地引导了几种外源蛋白的分泌。分泌表达载体主要有:pPIC9,pPIC9K,pHIL-S1,pPICZα A,pYAM75P等。胞内表达载体主要有:pHIL-D2,pA0815,pPIC3K,pPICZ,pHWO10,pGAPZ, pGAPZa(Invitrogen),pPIC3.5K等。工程菌株Y11430,MG1003,GS115 (AOX1),KM71,SMD1168。毕赤酵母宿主菌常用的有GS115和KM71两种,都具有
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