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引物设计与合成
上海信帆生物科技有限公司提供各种引物设计服务
用途:定量PCR, SNP检测,基因检测,表达分析,DHPLC,恒温扩增,基因检测,感染等
服务特点:
1. 提供引物设计的参考序列,设计原理和分析报告,让您对您的引物或探针的性能和特点有一个全面的了解,便于您对实验结果的认识和分析。
2. 可提供扩增前的与处理及扩增后服务:包括,核酸提取,pcr,核酸纯化,序列分析,数据统计等服务。
3. 一次的服务,全程的保障。
引物设计与合成
| 内容 | 常规引物 | 荧光定量引物(染料法) | 荧光定量引物、探针 | |
| 服务周期 | 3个工作日 | 5个工作日 | 7个工作日 | |
| 公司提交 结果 |
l 合成引物成品 l 引物合成报告单 l 引物温度梯度电泳图 l 终优化的PCR反应条件及电泳图 |
l 荧光定量实验引物成品 l 标准品 l 引物合成报告单 l 引物温度梯度电泳图 l 终优化的PCR反应条件及电泳图 l 荧光定量标准曲线图、溶解曲线图 |
l 荧光定量实验引物成品 l 引物合成报告单 l 引物温度梯度电泳图 l 终优化的PCR反应条件及电泳图 |
l 荧光定量引物及探针成品 l 标准品 l 引物、探针合成报告单 l 引物温度梯度电泳图 l 终优化的PCR反应条件及电泳图 l 荧光定量标准曲线图 |
| 客户提供 信息 |
l 检出基因名称(含Genbank登录号) l 基因种属 l 实验目的、要求 |
l 检出基因名(含Genbank登录号) l 基因种属 l 实验目的、要求 |
l 检出基因名称(含Genbank登录号) l 基因种属 l 实验目的、要求 |
l 检出基因名称(含Genbank登录号) l 基因种属 l 实验目的、要求 l Taqman探针标记荧光种类 |
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文献和实验效率,比如电转化比化学转化的效率更高。 3. 如何设计目的片段引物? PCR 引物设计,是决定实验是否成功的重要一环,现有的 PCR 设计工具,比如Primer-BLAST (NCBI)、Primer Designer Tool (Thermo Fisher)、 Primer3 等都可以针对目标序列设计出相应的引物,可以根据目标序列特征、实验室资源来选择合适的引物设计工具。如果后续通过无缝克隆的方法构建载体,在设计 PCR 引物时,还需要将同源臂序列添加到上下游引物的两端。具体添加方法可参考所用的同源
子的第 3 位如扩增编码区域,引物 3' 端不要终止于密码子的第3位,因密码子的第 3 位易发生简并,会影响扩增的特异性与效率。 5、引物 3' 端不能选择 A,最好选择 T 引物 3' 端错配时,不同碱基引发效率存在着很大的差异,当末位的碱基为 A 时,即使在错配的情况下,也能有引发链的合成,而当末位链为 T 时,错配的引发效率大大降低,G、C 错配的引发效率介于 A、T之间,所以 3' 端最好选择 T。 6、碱基要随机分布 引物序列在模板内应当没有相似性较高,尤其是 3’ 端相似性较高的序列,否则容易
开始之前:其实非常简单,不需要你下载任何软件,但是你得有一台电脑能上网。当然,最重要的是,你要很清楚用于做引物的模板序列,至于怎么找模板序列,不再本次讨论范围。另外,要先对PCR目的序列的长度有个大致估计,好了,马上开始吧:第一步:找到Primer3的站点。 你不用记住这个站点,但是要记住“Primer3”这个词,然后打开GOOGLE首页,输入Primer3,跳出来的第一个项目就是了“Primer3 Input 0.4.0 ” 。第二步:贴上模板序列。 进入Primer3站点,可以看到一个引物设计
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