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- 2025年07月13日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
半年
- 英文名：
pRRLSIN.CPPT.PGK-GFP.WPRE
- 库存：
200
- 供应商：
沪震生物
- 规格：
5μg
pRRLSIN.CPPT.PGK-GFP.WPRE
产品信息
| 产品货号 | 产品名称 | 产品规格 | 优惠价 |
|---|---|---|---|
| HZ10379 | pRRLSIN.CPPT.PGK-GFP.WPRE | 20μl |
¥请询价 |
使用说明
基本信息
| 启动子: | hPGK，T3，T7 |
|---|---|
| 复制子: | pUC ori,f1 ori,SV40 ori |
| 终止子: | SV40 poly(A) signal |
| 质粒分类: | 病毒系列，慢病毒克隆载体 |
| 原核抗性: | Amp |
| 克隆菌株: | Stbl3 |
| 培养条件: | 37℃，有氧 LB |
| 表达宿主: | 哺乳细胞 |
| 诱导方式: | 无须诱导，瞬时表达 |
| 5'测序引物: | pEGFP-C-5:CATGGTCCTGCTGGAGTTCGTG |
| 3'测序引物: | 根据序列设计引物 |
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文献和实验大基因做慢病毒总是滴度低？先换成大基因专用载体 GV747 再说
。 排查类问题最怕一上来同时改很多条件。更稳妥的做法是先确认现象属于载体、病毒、细胞还是检测层，再一次只改一个关键变量。 慢病毒的"容量"到底是多少 慢病毒载体的理论装载上限通常说到 8-9kb，但这个数是理论值，指的是包装信号之间能塞进去的全长序列。真正留给你目的基因的空间要先扣掉必需元件：LTR、RRE、包装信号 ψ、cPPT、WPRE、启动子、筛选标记、报告基因、polyA。这些加起来往往就要 2.5-3kb，所以常规载体上"目的基因可用空间"大约剩 5-6kb，而滴度开始明显下滑的位置
因为诺奖，这些AAV要火了——诺奖级技术「光遗传学」实操全解析
1-SFOs 阳离子通道 560 nm / 390 nm 32 s / 5 min - 二、表达递送：让蛋白"住"进正确的细胞 与GFP的遗传编辑类似，在特定细胞中表达光敏蛋白可通过病毒注射或转基因动物实现。但转基因动物操作复杂、周期长、成本高——因此目前体内神经元表达光敏蛋白主要采用病毒载体注射，常用安全高效的腺相关病毒AAV，细胞特异性则一般通过特异性启动子实现。 吉凯客户文献：PMID: 42139357 但这里有一个绕不开的坑：光敏蛋白必须在细胞内有足够的表达
。这种删除能确保病毒RNA 逆转录并整合入靶细胞染色体后,从5′LTR 端启动子起始的复制被有效抑制。这种设计的另一个优势是 能增强瞬时表达效率,这可能与减少了病毒LTR 和细胞启动子之间的启动子竞争有关。2.6 其它类型在改进慢病毒载体生物安全性的同时, 科学家们在基因转移效率方面对病毒载体做了一些改构,以期提高目的基因的转导效率及在靶细胞中的表达效率。Zufferey 等将美洲旱獭肝炎病毒的翻译后调节元件(WPRE) 插至载体3′末端 。翻译后水平WPRE可以促进转录物出核,还可以通过上调初级
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