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- HZbscience
- 中国/美国/德国
- HZ0153
- 2025年07月13日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
半年
- 英文名：
pEGFP-N2
- 库存：
200
- 供应商：
沪震生物
- 规格：
5μl
pEGFP-N2
产品信息
| 产品货号 | 产品名称 | 产品规格 | 优惠价 |
|---|---|---|---|
| HZ0153 | pEGFP-N2 | 20μl |
¥请询价 |
使用说明
基本信息
| 启动子: | CMV |
|---|---|
| 复制子: | F1 ori SV40 ori pUCori |
| 终止子: | SV40 poly(A) signal |
| 质粒分类: | 哺乳细胞，荧光蛋白报告载体 |
| 质粒大小: | 4737bp |
| 原核抗性: | Kan |
| 筛选标记: | Neo |
| 克隆菌株: | DH5α |
| 培养条件: | 37℃，有氧 LB |
| 表达宿主: | 哺乳细胞 |
| 诱导方式: | 无须诱导，瞬时表达 |
| 5'测序引物: | CMV-F：CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG |
| 3'测序引物: | pEGFP-N: CGTCGCCGTCCAGCTCGACCAG |
质粒简介
质粒图谱
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文献和实验Restriction Map and Multiple Cloning Site of pEGFP-N2. (Unique restriction sites are in color or bold.) The Not I site follows the EGFP stop codon. The Nhe I site cannot be used for fusions since it contains an in-frame stop codon
maoliping70：pEGFP-N1为载体表达的核蛋白要确证表达于核内的方法为用PI染色，PI只与核酸结合，在488nm激发下发红光，而GFP发绿光，红光与绿光重叠发黄光。还有以下疑问：1.作为对照的pEGFP-N1空载体转染细胞后表达的GFP蛋白为27KD，能自由通过核孔复合体，也就是说GFP在核内也有表达，那会与PI重叠发黄光影响测定吗？2.有提出GFP在细胞固定时，会从细胞漏出，那细胞本身表达的浆蛋白若分子量小，也会漏出吗？还是因为有定位信号而不漏出？3.细胞固定用的70%乙醇是直接
出来，可能两个原因，第一个是抗体不好，第二个可能是质粒没做好，发生移码了，因为你用的是pEGFP-N2载体，gfp是在n端，就算发生了移码一样可以检测到绿色萤光，仔细检查下你做的质粒看看是否正确。 liuruya 谢谢大家的回复 1.WB应该是没有技术问题，用的是GFP或flag的标签抗体，而且设置了之前做过的基因做阳性对照 2.GFP质粒测序过是完整的且没有移码，flag的是自己构建的也反复check过没有问题 觉得很妖怪 问了当时给我质粒
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