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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
半年
- 英文名:
pHAGE-TO-dCas9
- 库存:
200
- 供应商:
沪震生物
- 规格:
5μl
pHAGE-TO-dCas9
产品信息
| 产品货号 | 产品名称 | 产品规格 | 优惠价 |
|---|---|---|---|
| HZ0906 | pHAGE-TO-dCas9 | 20μl |
¥请询价 |
使用说明
基本信息
| 质粒分类: | 基因编辑载体;慢病毒哺乳细胞CRISPR-Cas9质粒 |
|---|
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文献和实验1.病毒载体可以进行哪些方面的基因操作?基因功能研究主要涉及功能获得和功能缺失,功能获得主要包括外源的过表达,内源性激活,功能缺失主要包括基因干扰和敲除等。借助病毒载体可以进行基因过表达、干扰、敲除和内源性激活等操作,其中基因包括编码基因和非编码基因。2 .不同基因调控方式的原理外源过表达:基因功能研究中通常需要上调目的基因的表达来观察表型的变化。过表达是将目的基因在宿主细胞大量表达的过程,其基本原理是将目的基因构建到工具载体上,导入细胞使基因实现大量转录和翻译,从而实现基因产物的过表达。使用
。 图6 phage display克隆基因示意图 Phage display的基本操作过程为:(1)提取某一病原体基因组DNA,用超声波将DNA切割成500~1 500的片段;(2)将片段末端用T4DNA聚合酶处理后,与载体DNA(phagemid)连接形成噬菌体质粒。用这些质粒与辅助噬菌体(helper phage)同时转染大肠杆菌。phagemid在大肠杆菌内包装成噬菌体,大量繁殖,同时将插入的外源基因片段表达,表达产物主要集中在噬菌体颗粒的表面;(3)将特定的受体
-of-function)是让基因表达变多或变强,常用三招:直接构建过表达载体、CRISPR-SAM 激活(CRISPRa)、saRNA 上调。功能缺失(loss-of-function)是让基因表达变少或彻底没,常用:RNAi 干扰(shRNA/siRNA)、CRISPR-Cas9 敲除、cas13d 干扰、dCas9-KRAB 转录抑制。优先级一般是 A>B>C>D,以你的实际需求为导向来选,不是越新越好。说白了,一类是"加量",一类是"减量或撤掉",方向完全相反。 它们分别在细胞里怎么跑 过表达是把编码序列连到
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