11089-65-9型衣霉素试剂现货供应

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百奥莱博专业生产供应11089-65-9型衣霉素试剂现货供应，我公司销售高质量、高纯度的生化试剂，同时价格极具竞争力，满心期待您的咨询订购。

名称：11089-65-9型衣霉素试剂现货供应
品牌：百奥莱博
规格：1mg
产地：国产|进口
本品是研究糖蛋白的工具，能通过抑制N-乙酰氨基葡萄糖-1-磷酸到一磷酸长醇的转移从而阻碍糖蛋白的形成。

CAS：11089-65-9
储存条件：2～8℃
性状：白色或浅黄褐色粉末

除11089-65-9型衣霉素试剂现货供应外，我公司正在打折促销以下产品：
F030708 BIOTIN标记兔抗人血清白蛋白抗体 Rabbit Anti-HSA*BIOTIN
ARB13522 鱼雌激素(E)含量检测 Fish e ELISA KIT
9014-01-1 碱性蛋白酶(1：200000)
抗坏血酸-6-棕榈酸酯 Ara-A 137-66-6
ARB11518 人胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)含量分析 Human thymic stromal lymphopoietin,tslp ELISA KIT
9032-75-1 Snailase　 蜗牛酶
PY02-343 CIN-Ⅰ培养基基础 250克
BL1303 BSA标准品(5mg/ml)
N-乙基-N-(3-磺丙基)-3-甲基苯胺钠盐 Ethyl cellulose 40567-80-4
BL0957 胶体金标记兔抗牛IgG抗体
ARB10221 人β乳糖蛋白抗体IgG elisa测定使用说明书 Human β anti-galactan proteins igG ELISA KIT
BTN131101 生物素化蛋白L Biotin-Protein L
F030410 胶体金标记山羊抗小鼠IgM抗体 Goat Anti-Mouse IgM*GOLD
11089-65-9型衣霉素试剂现货供应关键词：衣霉素试剂,Tunicamycin,11089-65-9


·潮霉素B
编号：QN0095
英文名称：Hygromycin B
规格：1g
本品由吸水链霉菌代谢产生的一种氨基糖苷类抗生素，通过干扰70S核糖体易位和诱导对mRNA模板的错读而抑制蛋白合成，从而杀死原核(如细菌)、真核(如酵母菌，真菌)和高等哺乳动物真核细胞。本品是无菌的潮霉素B溶液(100mg/ml)，可直接用培养液稀释使用。

CAS：31282-04-9
分子式：C20H37N3O13
分子量：527.52
储存条件：2～8℃
性状：澄清或轻微浑浊黄色溶液

大肠杆菌( Escherichia coli.)来源的潮霉素抗性基因(hyg或hph)，编码潮霉素B磷酸转移酶，将潮霉素B转化成不具有生物活性的磷酸化产物，从而起到解毒作用。针对这一原理，潮霉素B是一种非常有用的选择性标记，用来筛选和维持培养成功转染潮霉素抗性基因的原核或者真核细胞。另外，由于作用模式的差异，常与G418，Zeocin™ 和Blasticidin S联合使用进行双抗性阳性细胞株的选择。潮霉素B还能用作抗病毒剂，因其选择性渗透进入因病毒感染增强通透性的细胞，且具有抑制翻译的功效。还可混合入动物饲料中起到驱虫功能。

使用方法：
1. 常用筛选浓度
注意：潮霉素B用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve)，即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。
一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

2. 杀灭曲线的建立
注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素最低浓度，可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现，至少选择5个浓度。
1)第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜;注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。
2)根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。

终浓度(μg/mL)	培养基体积(ml)	5mg/ml潮霉素B加入体积(ml)
50	9.9	0.1
100	9.8	0.2
250	9.5	0.5
500	9.0	1.0
750	8.5	1.5
1000	8.0	2.0

3)第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4)接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5)按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的最低浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。

3. 稳定转染细胞的筛选
1)转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤效果最好。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%。
2)每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3)筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。
4)挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5)之后更换正常培养基培养即可。


11089-65-9型衣霉素试剂现货供应关键词：衣霉素试剂,Tunicamycin,11089-65-9
我公司立足北京，辐射全国。随着产品战略的不断延伸，产品理念的不断完善，百奥莱博将逐步成长为一流的生化试剂供应商，并一如既往的为您提供优质的衣霉素试剂和完善的售后服务，与您一起携手整合各自的优势资源，竭尽全力支持您的事业，为中国生命科学的发展贡献一份力量。



·细胞核提取试剂盒
编号：QN1309
英文名称：Nuclear Extraction Kit
规格：50T|100T
细胞核提取试剂盒用于从动物细胞或组织中分离出完整而纯化的细胞核。适合于动物软组织(肝或脑组织)和硬组织(肌肉)以及培养细胞的细胞核的制备。其制备物产量高，可以被用于细胞凋亡、信号传递、代谢和蛋白组学等的研究。产品不含污染性蛋白酶和核酶，性能稳定。

操作步骤：
1. 样本处理
a. 组织匀浆：称取100~200 mg新鲜组织如肝脏、脑、心肌等，PBS或生理盐水冲洗，洗净血水，滤纸吸干，用剪刀剪为碎块放入小容量玻璃匀浆器内。加入1.0 mL预冷的Lysis Buffer，再加入50μL Reagent A，0℃冰浴中上下研磨组织20次;有未研磨开的组织，可用双层纱布过滤。
b. 培养细胞匀浆：消化细胞，PBS洗涤，800 g 离心5~10 min收集细胞，计数。每次提取需要5 ×107个细胞，加入1.0 mL冰预冷的Lysis Buffer重悬细胞，再加入50μL Reagent A，将细胞悬液转移到小容量玻璃匀浆器内，0℃冰浴研磨细胞20~30次。
2. 将组织或细胞匀浆物转移到1.5mL离心管中，4℃，700g 离心5 min。细胞核沉淀在收集管底部，弃上清。加入0.5 mL冰预冷的Lysis Buffer重悬沉淀。
3. 取另一新离心管内加入0.5 mL Medium Buffer，吸取上一步的重悬液，沿管壁小心地加入到此离心管中，置于Medium Buffer之上，4℃，700 g 离心5min。细胞核沉淀在管底。
4. 弃上清，在细胞核沉淀中加入0.5 mL Lysis Buffer重悬细胞核沉淀，1000g 离心10min ，弃上清，得到较纯的细胞核沉淀。
5. 用50-100μL Store Buffer 或合适的反应缓冲液重悬细胞核沉淀，立即使用或-70℃保存。

注意事项：
1. 为保证获得完整的细胞核，务必做到：第一，全程低温操作;第二，快速;第三，在不破坏亚细胞器的情况下破碎细胞，这是制备细胞核的最关键环节。与组织块相比，培养细胞特别是贴壁培养细胞在用玻璃匀浆器匀浆时较难破壁，因而要选用小容量玻璃匀浆器、间隙严密的研杵上下研磨培养细胞。
2. 以离心力g计算正确的离心速度，不同的离心机可据此精确计算离心速度。
3. 进行Western Blot和2D-胶电泳，可直接加入上样缓冲液裂解细胞核。转速与离心力换算：G＝1.11×(10-5)×R×[rpm]2 G为离心力，一般以ｇ(重力加速度)的倍数来表示;[rpm]2即：转速的平方;R为半径，单位为厘米。

储存条件：4℃



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