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名称:活细胞示踪剂CMFDA(绿色)多少钱
编号:SY0558
英文名:CellTracker Green CMFDA (5-Chloromethylfluorescein Diacetate)
规格:50μg
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
MFDA,英文全称5-chloromethylfluorescein diacetate,是一种可自由透过活细胞膜对细胞进行示踪的荧光染料。
CMFDA是二乙酸荧光素(Fluorescein diacetate,FDA)的氯甲基衍生物,具细胞膜渗透性,无色,不具有荧光发光性。当通过被动运输穿透细胞膜进入活细胞后,CMFDA中的亲脂性基团可被胞浆内非特异性酯酶水解,生成5-氯甲基荧光素(5-chloromethylfluorescein);5-氯甲基荧光素可发出绿色荧光,因带电荷而不能自由穿透细胞膜,并利用自身氯甲基与细胞内蛋白和多肽中的谷胱甘肽在谷胱甘肽巯基转移酶作用下生成加合物,能完好的保留在胞内。经CMFDA标记的细胞,荧光非常稳定,稳定标记的时间可达数天(至少3天),因此非常适用于细胞分化和形态发生等研究。与常用的钙黄绿素和FDA相比,具有较长时间的细胞内信号保留特点。
在细胞分裂增殖过程中,CMFDA标记荧光可分配至两个子代细胞中,且具有不会使邻近细胞染色的功能(有极少情况下通过细胞间缝隙连接发生染色)。同时,CMFDA标记荧光还主要用于分析细胞间融合、细胞粘附及多药耐药转运蛋白的研究。此外,CMFDA还可用于与其他细胞示踪染料联合选择性标记感染细胞内的病原菌;与膜不通透性核荧光探针共同使用,可用于细胞活性研究。
本品具有细胞示踪试剂理想的特性:稳定、无毒(工作浓度范围内)、细胞内荧光保留性好、强荧光(生理pH范围内)。CMFDA标记细胞呈绿色荧光,Ex=492nm,Em=517nm,可与其他颜色荧光染料,如红色荧光蛋白(red fluorescent protein,RFP)等共染。本品以粉末形式提供,需用DMSO制备储存液后再使用。
中文名称:5-氯甲基荧光素二醋酸酯
英文名称:5-chloromethylfluorescein diacetate
CAS:136832-63-8
分子式:C25H17ClO7
分子量:464.85
外观:无色固体
Ex/ Em:492/517nm
储存条件:-20℃避光干燥,避免反复冻融,有效期一年。
结构式
注意事项
1)不同的细胞其细胞内酯酶活性不同,因此染色效果具有差异性。
2)荧光染料均存在淬灭问题,染色过程需尽量避光。
3)避免使用含有巯基的缓冲液。
4)为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
关于活细胞示踪剂CMFDA(绿色)多少钱的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·全能核酸酶
编号:SY0325
英文名称:Benzonase Nuclease
规格:25KU
全能核酸酶,又称广谱核酸酶,英文名称Benzonase Nuclease,一种来源于Serratia Marcescen的非特异性核酸内切酶,可在链内任意核苷酸间进行切割,将核酸完全消化成3-8个碱基长度的5-单磷酸寡核苷酸,能够在非常广泛的条件下(6M urea, 0.1 M Guanidine HCl, 0.4% Triton X100, 0.1% SDS, 1 mM EDTA, 1 mM PMSF)降解所有形式的(双链,单链,线状,环状,天然或变性)DNA和RNA,广泛用于去除生物制品中的核酸。
本产品由经基因工程改造的真核生物酵母菌表达纯化所得,不含原核生物表达体系自身的细菌内毒素,不仅应用在科研研究中,作为培养细胞上清和细胞裂解液去粘度的首选酶制剂,去除核酸干扰提高后续蛋白纯化或功能研究;而且应用在疫苗工业、蛋白和多糖类制药工业,去除宿主残留核酸,大大降低疫苗和蛋白类产品核酸污染至皮克级别,显著提高制品生物功效。
本品以无菌液体酶的形式提供,储存于缓冲液(20mM Tris-Cl pH8.0, 2mM MgCl2, 2mM NaCl, 50%甘油)中,无色透明液体。
英文别名:BenzNuclease; Universal Nuclease; Benzonase endonuclease
CAS:9025-65-4
分子量:27.9 kD
纯度:≥ 90%(SDS-PAGE)
酶活:≥250 U/μL
比活:≥1.0×106 U/mg蛋白
蛋白酶:Undetected
内毒素:Undetected(鲎试剂法)
最适pH:8.0(工作范围pH6-10)
最适温度:37℃(工作范围0-42℃)
辅助因子:1~10 mM Mg2+
储存缓冲液:20mM Tris-Cl pH8.0, 2mM MgCl2, 2mM NaCl, 50%甘油
稀释缓冲液:20mM Tris-Cl pH8.0, 2mM MgCl2, 2mM NaCl
活性单位定义:在37℃,pH8.0反应条件,2.625ml反应体系中,在30min内使△A260吸收值变化1.0(相当于完全消化37μg 鲑鱼精DNA成为寡核苷酸)所用的酶量定义为一个活性单位(U)。
储存条件:-20℃,有效期2年。
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·EDTA抗原修复液(50×)
编号:SY0764
英文名称:Antigen Retrieval Buffer (50×EDTA Buffer, pH 8.0)
规格:100ml
免疫染色实验,细胞或组织往往需要经多聚甲醛、甲醛或其他醛类固定来维持本身的形态结构,然而此步操作通常会封闭抗原决定簇,使得相当多的抗原不能与抗体很好的进行反应,从而引起染色信号衰减,甚至出现假阴性现象。引起抗原决定簇被掩盖的原因在于:1)醛类固定剂导致组织上的许多氨基酸残基在分子内或分子间形成醛键,从而封闭抗原表位;2)醛类固定剂在固定过程中与蛋白质发生交联(cross-link),形成醛交联蛋白,导致抗原表位被封闭。因此,需要对固定组织进行抗原修复(antigen retrieval,AR)来逆转被掩盖的抗原表位,使其重新暴露出来,恢复抗原表位-抗体的结合能力,从而改善染色效果。
抗原修复的方法非常多,主要有热诱导的抗原修复(Heat Induced Epitope Retrieval,HIER)和酶诱导的抗原修复(Proteolytic Induced Epitope Retrieval),修复方法的选择需要考虑到抗原表达程度、抗体要求、组织类型以及组织固定方法等因素。作为免疫染色至关重要的一步,抗原修复方法的选择、温度、pH值、修复时间、修复介质都会影响到实验结果。实验者需根据自身的实验体系以及实验条件来选择恰当的修复溶液,从而达到最佳的修复效果。
本品为EDTA抗原修复缓冲液,pH8.0,是一款非常经典且应用广泛的热修复缓冲液之一,适用于大多数的抗原,经此缓冲液修复后的染色信号明显得以增强。本品特别适合用于石蜡切片,也可用于冰冻切片等其他样本。本品为50×浓缩的EDTA抗原修复液,使用前需用ddH2O稀释成1×工作液。按照每个片子需10ml抗原修复液的量来计算,约可做500个样品。
注意事项
1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2)抗原修复通常用于醛类固定的石蜡切片,而冰冻切片由于组织比较脆弱,易在修复过程中被破坏掉,因此比较少进行抗原修复。然而醛类固定的冰冻切片同样会发生蛋白交联而封闭抗原表位,导致染色效果不佳。很多文献资料表明采用适当的方法进行冰冻切片抗原修复,也能显著改善染色效果。特别是当染色效果欠佳的前提下,可考虑进行冰冻切片的抗原修复。
3)修复过程中一定要使用足量的修复液(1×)来完全浸没组织切片。
4)不同pH的修复液对修复效果的影响很明显,归于传统习惯使用柠檬酸钠修复液,pH6.0(SY0763)比较多。目前很多资料表明绝大多数抗原(抗体),使用高pH值(约8.0或9.0)的修复液能得到更好的染色效果。
储存条件:-20℃,有效期一年。
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4-甲基伞形酮酰-α-D-吡喃糖苷 Enzyme Stabilizer AES 38597-12-5
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