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- HZbscience
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- HZ0159
- 2025年07月05日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
半年
- 英文名：
pECMV-3×FLAG-N
- 库存：
200
- 供应商：
沪震生物
- 规格：
5ug
pECMV-3×FLAG-N
产品信息
| 产品货号 | 产品名称 | 产品规格 | 优惠价 |
|---|---|---|---|
| HZ0159 | pECMV-3×FLAG-N | 5μg |
¥请询价 |
使用说明
基本信息
| 启动子: | CMV promoter，T7 promoter |
|---|---|
| 复制子: | f1 ori，SV40 ori |
| 终止子: | SV40 poly(A) signal |
| 质粒分类: | 哺乳系列质粒；哺乳表达质粒；pCMV系列质粒 |
| 质粒大小: | 5508bp |
| 质粒标签: | N-3×FLAG |
| 原核抗性: | 氨苄青霉素Amp |
| 筛选标记: | 新霉素Neo |
| 克隆菌株: | DH5α等哺乳细胞 |
| 培养条件: | 37℃，有氧，LB |
| 表达宿主: | 293T等哺乳细胞 |
| 诱导方式: | 无需诱导，瞬时表达 |
| 5'测序引物: | pCDNA3.1-F（CTAGAGAACCCACTGCTTAC） |
| 3'测序引物: | pCDNA3.1-R（TAGAAGGCACAGTCGAGG） |
质粒简介
质粒图谱
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文献和实验的核心。 --- 二、WB 验证的三个技术要点 1. 抗体怎么选 有目的基因特异性抗体 → 直接检测内源+外源总蛋白； 抗体不可得或背景差 → 载体设计时加 Flag/HA/Myc 等融合标签，用抗标签抗体检测； 注意区分：抗标签抗体检测的是"载体表达的蛋白"，基因特异性抗体检测的是"总蛋白（含内源）"，两者含义不同，报告时要写清楚。 2. 条带大小要核对 融合标签会改变蛋白分子量（如 3×Flag 约 +2.5 kDa，GFP 约 +27 kDa）。WB 条带必须与"内源蛋白 + 标签
HBsAg 的复钙人血浆，阳性对照品 HBsAg 的含量标明为 P=9±2ng /ml。每次试验设 2 个阳性对照和 3 个阴性对照。测得A值后，先计算阴性对照A值的平均数（NC X ）和阳性对照A值的平均数（PCX），两个平均数的差（P-N）必须大于一个特定的数值（例0.400），试验才有效。3 个阴性对照 A 值均应≥0.5×NCX，并 ≤1.5×NCX，如其中之一超出此范围，则弃去，而已另两个阴性对照重新计算 NCX；如有两个阴性对照 A值超出以上范围，则该次实验无效。阳性判定值按下式计算： 阳性
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