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- KALANG
- 中国大陆
- KL-D8559
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
长期
- 库存：
大量
- 供应商：
康朗生物
- 规格：
5KU|1KU
核酸内切酶 III(Nth)
规格：5KU|1KU特性:
单细胞凝胶电泳（彗星试验）
碱性析出
碱解旋
概述:
E. coli 核酸内切酶 III（Nth）既有 N-糖基化酶活性也有 AP-裂解酶活性。N-糖基化酶活性可释放双链 DNA 上受损的嘧啶碱基，产生一个脱嘧啶（AP）位点。AP-裂解酶活性则切割 AP 位点的 3´ 端，产生一个 5´ 磷酸和一个 3´ 磷酸-α,β不饱和醛。
被核酸内切酶 III 识别并切除的受损碱基包括:尿素、5,6-二羟基胸腺嘧啶、胸腺嘧啶乙二醇、5-羟基-5-甲内酰脲、尿嘧啶乙二醇、6-羟基-5,6-二羟基胸腺嘧啶和甲基羟丙二酰脲。
来源:
克隆有 nth 基因的重组 E. coli 菌株。
反应条件:
1X Endonuclease III（Nth）反应缓冲液
[20 mM Tris-HCl，1 mM EDTA，1 mM DTT（pH 8.0 @ 25℃）]，37℃ 温育。
热失活:65℃ 加热 20 分钟。
质保声明:
核酸内切酶 III（Nth）经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。更多信息请联系我们咨询。
单位定义:
1 单位指在 10 μl 反应体系中，37℃ 条件下，1 小时能切割 1 pmol 含一个 AP 位点* 的 34 bp 寡核苷酸双链所需要的酶量。单位活性检测条件请联系我们咨询。
* AP 位点的创建方法如下:37℃ 条件下，用 1 单位尿嘧啶-DNA 糖基化酶（UDG） 处理 10 pmol 含一个尿嘧啶碱基的 34 bp 寡核苷酸双链 2 分钟。
彗星试验的推荐稀释倍数:1:104～1:105。详细步骤请联系我们咨询。
浓度:
10,000 units/ml。
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文献和实验相关专题 限制性核酸内切酶产品选择专题 一般是以微生物属名的第一个字母和种名的前两个字母组成，第四个字母表示菌株(品系)。例如，从Bacillus amylolique faciens H中提取的限制性内切酶 称为Bam H，在同一品系细菌中得到的识别不同碱基顺序的几种不同特异性的酶，可以编成不同的号，如HindII、HindIII，HpaI、HpaII，MboI、MboI等。 限制性内切酶(restriction
(RNA interference ，RNA i) 通路中，长片断的双链RNA 进入细胞后会被一个类似RNase III 的内切核糖核酸酶(Dicer) 降解为一系列的21―23bp 长度，3’端有两个碱基突出（带羟基）5’磷酸化的siRNA s 。这些siRNA s 介导同源转录本的降解，从而导致基因表达沉默。( 1-5)大肠杆菌Escherichia coli RNase III 参与多种细菌RNA s，噬菌体甚至是质粒来源的RNA s 降解(6-9) ，能够将长片断的双链RNA s降解为一系
热失活是终止酶切反应的一种简便易行的方法。大多数最适反应温度是37℃的酶在65℃下温育20分钟即可失活。一些在65℃下不能失活的酶如将温度升高至80℃，温育20分钟也可失活。下表注明了每种酶的失活条件。 在50μl的反应体系中，37℃条件下，以0.5μg小牛胸腺DNA作为底物，加入5-10μl内切酶及相应缓冲液，反应60分钟，然后升温至65℃或80℃温育20分钟进行热失活。在上述混合液中加入0.5μg底物DNA（通常为λDNA），调节温度至最适反应温度，温育60分钟。若琼脂糖电泳显示底物
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