PCNA细胞增殖检测试剂盒(ICF/FACS法)价格厂家

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名称：PCNA细胞增殖检测试剂盒(ICF/FACS法)价格厂家
规格：20T
编号：KFS335
品牌：百奥莱博
英文名：PCNA cell proliferation Detection Kit
产地：国产|进口
PCNA 细胞增殖检测试剂盒（细胞免疫荧光法/流式细胞仪检测），PCNA是细胞DNA 多聚酶的“δ”辅助蛋白，是真核细胞DNA 合成时所必需的一种酸性核蛋白。PCNA 在细胞核内合成，并储存在核内，细胞处于静止状态时，其含量很低，当细胞进入增殖周期中，其表达明显增加，故PCNA 的表达高低可反映细胞增殖的活跃程度。

操作方法
1. 在最适的环境下培养细胞。
2. 除去培养液，用PBS 洗一次。
3. 胰蛋白酶处理和收集细胞，离心，（注意1）保证每管细胞数在106 个。
4. 用0.3 ml PBS 轻轻的重悬细胞, 然后慢慢加入0.7 ml 预冷的100%乙醇。用1 ml 玻璃移液管小心的混匀。在4°C 至少1h。（注意2）
5. 沉淀细胞，完全吸去上清。
6. 用150 μl PBS/1 % BSA 洗细胞2 次。
7. 用100μl 抗体孵育液（0.5% Tween-20/1%BSA/PBS）重悬细胞，加入1ul PCNA 抗体(1μg/106 cells)，室温孵育1 小时。
8. 离心收集细胞，用150μl1% BSA-PBS 洗2 次。
9. 离心收集细胞，用50μl 抗体孵育液重悬，加1μl (1.5μg/106 cells) 羊抗鼠IgG-FITC，室温孵育30 分钟。离心收集细胞，150μl PBS/ 1 % BSA 洗2 次。
10. 用含有终浓度为10 μg/ml RNase A 和20μg/ml PI 的0.5 ml PBS（pH7.4）重悬细胞。
11. 避光使细胞在室温下孵育20min 后，离心收集细胞，150μl PBS/ 1 % BSA 洗2 次后，转移至流式检测管中重悬。
12. FACS 检测或者储存于4℃。

注意事项
1.所有的沉淀细胞步骤为2,000 rpm, 5 min。
2.可渗透化处理细胞后细胞浓度大约为106 ，样品可以4°C 储存于乙醇中到2 个星期。
3.流式细胞检测时需要设立对照试验：
只用PI 染细胞
只用羊抗小鼠IgG-FITC 染细胞
未染色的细胞组

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·0.1M 硼酸缓冲液，pH8.4
编号：KFS330
规格：100ml
本产品为0.1M 的硼酸缓冲液。可应用于BrdU 增殖检测酸处理的中和等实验。本品含有100mM 的硼酸、75mM NaCl，25mM 的四硼酸钠，pH 为8.4。

·过氧化氢(H2O2)测试盒
编号：KFS349
规格：50T
过氧化氢H2O2 可以与钼酸作用生成一种络合物在405 nm 处测定其生成量可计算出H2O2 的量。

·Ac-DEVD-FMK(Caspase 3 抑制剂)
编号：KFS266
英文名称：Caspase 3 Inhibitors Ac-DEVD-FMK
等级：5mM in DMSO
规格：20μl

浓度：5mM in DMSO
分子式：C30H41FN4O12
分子量：668.7
纯度：≥95% (TLC)
储存：-20℃，有效期6个月

·kFluor647-EdU法细胞增殖检测试剂盒(流式)
编号：KFS328
英文名称：Caspase 3 Inhibitors Ac-DEVD-FMK
等级：5mM in DMSO
规格：20T|10T|50T
细胞增殖检测是评估细胞健康程度、遗传毒性及抗肿瘤药物效果的基础实验手段。最精确的检测细胞增殖方法是BrdU法。EdU法检测试剂盒是brdu方法的革命性突破。EdU（5-溴-2-脱氧尿嘧啶）试剂盒是一种嘧啶类似物，可以在DNA合成期整合入DNA双链。EdU法检测是基于“点击”反应，一种由铜催化的叠氮化合物和炔烃的原子共价反应。

本试剂盒中，EdU试剂含有炔烃，而kFlour647染料试剂含有叠氮化合物。点击法的EdU标记增殖快速有效，易于使用。只需少量的叠氮化染料即可非常有效地标记出整合的EdU。标准化的戊二醛固定和去污剂促渗可以使检测试剂进入细胞，而brdu方法则需要DNA变性（如酸变性、热变性或者用Dnase消化）去暴露BrdU，从而方便BrdU抗体结合。

·Z-LE(OMe)HD(OMe)-FMK(Caspase 9 抑制剂)
编号：KFS270
英文名称：Caspase 9 Inhibitors Ac-LEHD-FMK
等级：5mM in DMSO
规格：20μl

浓度：5mM in DMSO
分子式：C32H43FN6O10
分子量：690.7
纯度：≥95% (HPLC)
储存：-20℃，有效期6个月

·EGFP标记Annexin V
编号：KFS241
英文名称：Annexin V-EGFP Reagent
等级：5mM in DMSO
规格：100μl(20T)
在正常细胞中，磷脂酰丝氨酸（PS）只分布在细胞膜脂质双层的内侧，而在细胞凋亡早期，细胞膜中的磷脂酰丝氨酸（PS）由脂膜内侧翻向外侧。

Annexin V 是一种分子量为35~36kD 的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力，故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此Annexin V 被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。将Annexin V 进行荧光素（EGFP）标记，以标记了的Annexin V 作为荧光探针，利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生。

注意事项
1. 微量试剂取用前请离心集液。
2. Annexin V-EGFP 避光保存及使用。
3. 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。
4. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，需用不含EDTA 的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中，防止进一步的损伤。
5. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。
6. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。

储存：-20℃避光，有效期12个月。


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