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北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液报价在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液报价
规格:2ml
品牌:百奥莱博
本品用于常规的SDS-PAGE蛋白样品的上样。5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(SDS-PAGE Sample Loading Buffer),是一种经过改良的以溴酚蓝为染料,5倍浓缩的蛋白上样缓冲液。
SDS可与蛋白质结合使蛋白质-SDS复合物上带有大量的负电荷,这时蛋白质本身的电荷完全被SDS掩盖,消除了各种蛋白质本身电荷的差异,SDS还可以断开分子内和分子间的氢键,破坏蛋白质分子的二级和三级结构,DTT可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键,破坏蛋白质的空间结构,消除了蛋白结构之间的差异。因此,电泳速度只是与其分子量大小有关。溴酚蓝用作电泳时的指示剂,可大概指示电泳结束的时间。
注意事项
1) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2) 5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液中含少量DTT,有轻微刺激性气味,但不含剧毒的巯基乙醇。
3)5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液必须完全溶解后再使用。
操作方法
1. 在室温或不超过37℃的水浴中溶解5×SDS-PAGE上样缓冲液。水浴溶解后立即室温存放,尽量避免长时间置于水浴中。
2.按照每4 μl蛋白样品加入1 μl 5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液的比例,混合蛋白样品和5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液。
3.100℃或沸水浴加热3-5分钟,以充分变性蛋白。
4.冷却到室温后,直接上样到SDS-PAGE胶加样孔内即可。
5.通常电泳至蓝色染料到达胶的底端处附近即可停止电泳。
储存条件:-20℃,有效期一年。
欲咨询购买5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液报价,请致电北京百奥莱博科技有限公司,为您提供最全面周到的产品服务,除此之外,我公司正在促销以下产品:
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文献和实验或 4℃过夜以捕获免疫沉淀复合物。 离心(3000 rpm,5 min)收集 Agarose 珠子,弃掉上清,用 800 µL-1000µL 预冷的 PBS 缓冲液洗涤珠子 3 次。(小心吸取上清,避免触碰底部珠子) 收集沉淀,加 60 µL 2×SDS 蛋白上样缓冲液中重悬沉淀,轻混均匀后煮沸 5 min,12000 rpm 离心 10 min。 将上清转移至一新离心管,进行 Western 检测。
糖珠用 1 ml 裂解缓冲液洗 3~4 次;最后加入 15 μl 的 2 × SDS 上样缓冲液,沸水煮 5 分钟。 6. SDS-PAGE,Western blotting 或质谱仪分析。 三、通过免疫共沉淀确定结合蛋白 1. 用磷酸盐缓冲液洗 30 块 10 cm 培养板上的适宜细胞。刮去每块板上的细胞到 1 ml 冰冷的 EBC 裂解缓冲液中。 2. 将每毫升细胞悬液转移到微量离心管中,在微量离心机上 4 ℃ 以最大速度离心 15 min。 3. 收集上清(约 30 ml)并加入 30 μg 的适当
L 缓冲液I 溶解包涵体;室温放置lh ;加9×缓冲液Ⅱ,室温放置30 min ,用KOH 调pH 到10.7 ;用HCI 调至pH 8 .0 ,在室温放置至少30 min ; 1000g 离心,15 min ,室温;吸出上清液并保留,用100 μL 2×凝胶电泳加样缓冲液溶解沉淀;取10 μL 上清,加10 μL 2× 凝胶电泳加样缓冲液,与20 μL 重新溶解的沉淀进行SDS-PAGE 。四、注意事项(1)不同的大肠杆菌表达载体带有不同的启动子和诱导成分。实验者必须根据特定系统和用途决定
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