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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
冷藏
- 保质期:
长期
- 英文名:
Reverse Transcriptase II
- 库存:
892
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销售耐热逆转录酶II打折促销,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:耐热逆转录酶II打折促销
品牌:百奥莱博
英文名:Reverse Transcriptase II
编号:SY0294
产地:国产|进口
Reverse Transcriptase(第二代耐热逆转录酶)是Reverse Transcriptase(第一代耐热逆转录)的升级产品,是在M-MLV (RNase H-) Reverse Transcriptase基础上通过体外分子进化技术获得的全新耐热逆转录酶。与上一代相比,进一步大幅提高了热稳定性,50℃下半衰期超过240min,并长时间耐受55℃高温且保持稳定,非常适合具有复杂二级结构的RNA模板的逆转录。此外,增加了多个突变位点,进一步增强了模板亲和力和行进性,大幅提升全长cDNA的合成能力,可获得长达20 kb的cDNA。另外,对于常见的逆转录抑制物具有更高的耐受度,非常适合于植物组织RNA的逆转录反应。
活性定义:以Poly(rA) Oligo(dT)为模板/引物,在37℃,10min内,掺入1 nmol的dTTP为酸不性溶物质所需要酶量定义为1个活性单位(U)。
质量控制
核酸外切酶残留检测:200 U本品和0.6 μg λ-Hind Ⅲ在37 ºC下孵育1h,DNA的电泳谱带不发生变化。
核酸内切酶残留检测:200 U本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA在37 ºC下孵育1h,DNA的电泳谱带不发生变化。
RNase残留检测:200 U本品和1 μg小鼠肝脏总RNA在37 ºC下孵育1h,RNA电泳谱带不发生变化。
功能检测1:逆转录体系中加入200 U本品,以100 pg Hela cell total RNA为模板,Oligo(dT)23为引物,50 ºC反应30min。取10% cDNA产物进行PCR扩增β-actin基因。琼脂糖凝胶电泳,EB染色,可见有单一的550 bp条带。
功能检测2:逆转录体系中加入200 U本品,以500 ng Hela cell total RNA为模板,Oligo(dT)23为引物,55 ºC反应45min。取10% cDNA产物进行PCR扩增Polε基因。琼脂糖凝胶电泳,EB染色,可见有单一的4.8 kb (GC-rich)条带。
功能检测3:逆转录体系中加入200 U本品,以1 pg-1 μg Hela cell total RNA为模板,Oligo(dT)23VN和Random Hexamers为引物,测试qRT-PCR 性能。以6个数量级的模板量的对数值对Ct值做标准曲线,R2>0.990,斜率在-3.20到-3.60之间。
准备工作
1. 防止RNase污染:请保持实验区域洁净;操作时需穿戴干净的手套、口罩;实验所用的离心管、枪头等耗材均需保证RNase free。
2. 引物选择:
2.1 后续实验为PCR
a, 如果模板为真核生物来源,一般情况下首选Oligo dT18,与真核生物mRNA的3’Poly A尾配对,可获得最高产量的全长cDNA。
b, 基因特异性引物 (GSP)的特异性最高。但有些情况下,用于PCR反应的GSP无法有效引导第一链cDNA合成。这时,可改用Oligo dT18或Random hexamers重新进行逆转录。
c, Random hexamers特异性最低,所有RNA,包括mRNA, rRNA, tRNA均可以作为Random hexamers的模板。当目标区域具有复杂二级结构或GC含量较高,或者模板为原核生物来源,使用Oligo dT18或基因特异性引物 (GSP)无法有效引导cDNA合成时,可使用Random hexamers为引物。
2.2 后续实验为qPCR
a, 将Oligo dT18与Random hexamers混合使用,可使mRNA的各个区域均能以相同效率引发cDNA合成,有助于提高定量结果的重复性。
关于耐热逆转录酶II打折促销的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·Alexa Fluor 594标记山羊抗小鼠IgG(H+L)
编号:SY0688
英文名称:Alexa Fluor 594 AffiniPure Goat Anti-Mouse IgG (H+L)
规格:100μl
本品是由Alexa Fluor 594标记的山羊抗小鼠IgG(H+L),使用抗原偶联的琼脂糖微珠从山羊抗血清内亲和色谱纯化所得。免疫电泳和/或ELISA法检测显示本品特异性结合完整的小鼠IgG分子,也会与其他小鼠免疫球蛋白的轻链结合。可能会与其他物种免疫球蛋白发生交叉反应,但不会识别非免疫球蛋白类的血清蛋白。Alexa Fluor 594的光谱性质类似于Texas Red,Amax(最大激发波长)为591nm,Emax(最大发射波长)为614nm。
本品适合做单标实验,广泛应用于多种免疫学实验如免疫细胞化学(ICC),流式细胞术(FC)以及免疫组化(IHC)等。要做多标(multiple-labeling)实验,建议使用与相近物种的血清蛋白或者免疫球蛋白预先经过亲和吸附处理的二抗。
浓度:0.75mg/ml
缓冲液:0.005M 磷酸钠,0.125M 氯化钠, pH 7.6
稳定剂:7.5mg/ml BSA(无IgG,蛋白酶),50% 甘油
荧光素:Alexa Fluor 594, Amax=591, Emax=614
防腐剂:0.025% 叠氮化*(代"钠")
推荐稀释比例:1:50~400(适用于大多数实验)
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期一年。
耐热逆转录酶II打折促销关键词:SY0294,Reverse Transcriptase II,耐热逆转录酶II
·Caspase 3活性检测试剂盒(比色法)
编号:SY0480
英文名称:Caspase 3 Assay Kit, Colorimetric
规格:20T
Caspase 3,即Cysteine-requiring Aspartate Protease 3,也称CPP32、Yama或apopain,属于Caspase家族的CED-3亚家族(CED-3 subfamily),系一种在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶,也是哺乳动物细胞中研究最多的一个Caspase。 Caspase 3可以剪切procaspase 3、6、7和9,且可以直接特异性剪切多种Caspase底物,包括PARP(poly(ADP-ribose)polymerase)、ICAD(Inhibitor of caspase-activated deoxyribonuclease)、gelsolin和fodrin等。这些由Caspase 3介导的蛋白剪切是细胞凋亡分子机制的重要组成部分。另外,caspase 3在细胞核凋亡和细胞起泡(Cell blebbing)过程中也起到了关键作用,包括染色质固缩(chromatin condensention),DNA*(代"片")段化(DNA fragmentation)等。
Caspase 3 Assay Kit, Colorimetric是一款简单快速检测细胞或组织内Casepase 3活性的试剂盒,其检测原理是基于Casepase 3可以催化底物Ac-DEVD-pNA(acetyl-Asp-Glu-Val-Asp p-nitroanilide)产生黄色的pNA(p-nitroaniline),pNA在405nm附近有强吸收,从而可以通过测定吸光度来检测Caspase 3的活性(黄色产物与Caspase 3酶的活性成正比)。 另外,本试剂盒中还提供了Caspase 3催化产生的黄色产物pNA,以此作为定量caspase 3酶活性的标准品。

试剂盒组份:
Lysis Buffer裂解液————8ml
Assay Buffer检测缓冲液——8ml
Ac-DEVD-pNA(2mM)—————200μl
pNA(10mM)————————200μl
注意事项
1)建议Ac-DEVD- pNA分装保存,尽量避免反复冻融;
2)pNA(中文名为4-硝基苯胺)有毒,请注意小心防护。pNA(10mM)在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内,可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
3)有报道少数类型细胞凋亡检测不到Caspase 3 的激活;
4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
储存条件:-20℃
耐热逆转录酶II打折促销关键词:SY0294,Reverse Transcriptase II,耐热逆转录酶II
·30%丙烯酰胺/甲叉双丙烯酰胺,37.5:1
编号:SY0344
英文名称:30% Acryl/Bis Solution, 37.5:1
规格:500ml
Acr-Bis常用于配制丙烯酰胺凝胶(PAGE胶),包括SDS-PAGE胶等,可以用于蛋白或核酸的分离。聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺(acrylamide,简称Acr)和交联剂甲叉双丙烯酰胺(N,N’-
methylene bisacrylamide,简称Bis )在催化剂的作用下,通过自由基引发聚合反应,形成不带电荷、且具有分子筛性质的网状结构。其孔径大小由聚合链的长度和交联度(交叉连接的程度)
所决定。
聚合链的长度与丙烯酰胺的浓度有关,交联度由Acr 与Bis的相对比例决定,调节单体丙烯酰胺与交联剂(Bis)的浓度比例,可形成具有不同交联度的网状聚合物。其中Bis的浓度愈低,凝胶的
孔径愈大,适用于分离较大的分子;Bis的浓度愈高,网孔越小,分辨率越高,越有利于分离较小的分子。
30% Acr-Bis(19:1)即为含30% acrylamide-bisacrylamide的水溶液,其中acrylamide和bisacrylamide的比例为19:1。
30% Acr-Bis(29:1)即为含30% acrylamide-bisacrylamide的水溶液,其中acrylamide和bisacrylamide的比例为29:1。
30% Acr-Bis(37.5:1)即为含30% acrylamide-bisacrylamide的水溶液,其中acrylamide和bisacrylamide的比例为37.5:1。
储存条件:4℃,避光。
北京百莱博科技有限公司是核酸扩增(PCR)产品的专业生产供应销售商,恭候您的咨询选购耐热逆转录酶II打折促销。
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文献和实验回收试剂盒,用抽滤的方法替代离心,使得实验可以连续进行,特别适合批量进行的需要――想象看,你只要将溶胶液加入装配好的抽滤管中,哗一下就抽干了,再加洗涤的试剂,哗一下又好了,多快呀!节约很多时间和功夫,不需要在离心机前面拿进拿出。以后的全自动操作模式就是这样的啦! 看到这里可能大家都会说Qiagen的东西好是好,但是就是贵,一般的实验室都舍不得平时用,往往留着关键时刻做,不错,好东西自然不便宜,不过他们有时候也会打折促销。
对大家有启发,在这里说一下,实际上主要是温度,至于放在TRIZOL中是不可取的,更不要说在胍里了,只-20是不够的,至少-80,液氮最保险,想想,在低温里,即使加上些RNA酶它也降解不了哇!qiagen出了一种easy产品可用于保存标本,但在常温也只是1天,所以低温才是首要的,抽的时候也是这样。3、反转录:常规,取样尽量一致,如上所述,不是为了定量,是为了半定量PCR时图形的好看。选择逆转录酶根据实验需要,少量的可用Promega的一种1ug的酶,多的我们用invitrgen的5ug的II,当然有人
取的,更不要说在胍里了,只-20是不够的,至少-80,液氮最保险,想想,在低温里,即使加上些RNA酶它也降解不了哇!qiagen出了一种easy产品可用于保存标本,但在常温也只是1天,所以低温才是首要的,抽的时候也是这样。 3、反转录:常规,取样尽量一致,如上所述,不是为了定量,是为了半定量PCR 时图形的好看。选择逆转录酶根据实验需要,少量的可用Promega的一种1ug的酶,多的我们用invitrgen的5ug的II,当然有人说Promega和Roche的也不错,用过
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