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- xuanya
- 中国/美国
- XY-TE-0476
- 2025年11月10日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
常温运输和保存
- 保质期：
两年
- 英文名：
SuperSYBR, EG
- 库存：
870
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
本产品是改良型的SYBRGreenI，它跟常规的SYBRGreenI相比检测灵敏度相当，但具有耐热、耐水解的特点，所以十分稳定，使用更加方便。
1.稳定，本产品浓缩液可以在常温下存放一年以上，方便运输和保存。本产品的1X工作液在常温下的半衰期为120多天，比常规的SYBRGreenI（5天）长20倍以上。
2.使用方便多样，既可以在制备凝胶时加入到融化的琼脂糖凝胶中，还可以象常规的SYBRGreenI、SYBRGold、SYBRsafe、GelStar一样用于电泳后染色。
3.灵敏，其检测灵敏度跟SYBRGreenI相同，比EB灵敏200-100倍。
4.低毒、环保、健康。
5.可检测各种核酸分子，包括dsDNA、ssDNA、RNA和Oligo。
6.兼容性好，不但与常用的TAE、TBE和5分钟超快电泳缓冲液SuperBuffer-2等兼容，还与常用的UV检测系统和可见光激发检测系统兼容。
7.对DNA泳动速度的影响小于常规的SYBRGreenI。
8.半衰期长，自然损耗低，可多次使用，使其相对使用成本比常规的SYBRGreenI和其它非对称花青类染料低。
电泳级耐热型SYBR染料运输及保存：
常温运输保存（闭光），保存期为一年。
自备试剂：电泳试剂
电泳级耐热型SYBR染料使用方法
本产品可以在电泳中染色，优点是用量少，但如果与DNA的比例没达到最佳时，带型容易弥散；也可以在电泳后染色，优点是不会对DNA电泳产生干扰，但用量大，还需要额外的染色过程。客户可以根据需要选择使用方法。xuanya不建议将本产品用于染色后再上样（即先将其与DNA混合然后再上样），也不建议将其用于PAGE(因分子较大,难以进入凝胶)。
电泳级耐热型SYBR染料使用方法之一：
电泳中染色(仅适于琼脂糖凝胶电泳)
1.按常规方法制备琼脂糖凝胶，胶中不能含任何其他染料。
2.将按1：10000的比例将SuperSYBR直接加到熔化的琼脂糖凝胶中并充分摇晃均匀（5uL可以加入到50mL熔化的琼脂糖凝胶中），然后倒胶。
3.其余的上样、电泳、UV观察等步骤按常规操作进行。在254nm紫外照射透视下，与双链DNA接合的SuperSYBR呈现绿色荧光。拍照时最好使用绿色滤光片。如果使用300nm紫外照射不如254nm。
4.未用完的胶可以反复融化，如果保存时间在一周以上，最好闭光。
注意：本方法的灵敏度比在熔化的琼脂糖凝胶中加EB染色的方法高，比电泳后染色经济（后者用量大）。SuperSYBR与DNA结合同SYBRGreenI跟DNA的结合一样，有时会影响DNA样品的相对迁移率。如果出现DNA电泳带弥散的现象，说明SuperSYBR和DNA的比例没达到最佳，可以适当调节DNA的上样量。
电泳级耐热型SYBR染料使用方法之二：电泳后染色
1.按照常规方法进行电泳。
2.用水将10000×SuperSYBR原液稀释2500倍成4×工作液（如：将5uLSuperSYBR原液加到10mL水和2.5mL5MNaCl中，加NaCl的目的是促进SuperSYBR与DNA的结合）。由于SuperSYBR对玻璃和非聚丙烯材料具有一定亲和力，故建议在稀释、贮存、染色等使用过程中用聚丙烯类容器。
3.将电泳后染色工作液倒入合适的聚丙烯容器中，放入凝胶，用铝箔等盖住容器使染料避光。室温振荡染色10-30分钟，染色时间因凝胶浓度和厚度而定。
4.在254nm紫外照射透视下，与双链DNA接合的SuperSYBR呈现绿色荧光。拍照时最好使用绿色滤光片。如果使用300nm紫外照射不如254nm。
电泳级耐热型SYBR染料注意：电泳后染色工作液可以冷冻避光储存，可以在一个星期内重复使用多次。
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文献和实验1992 年，Higuchi 在一次报告中提出了实时荧光定量 PCR 技术。通过检测溴化乙锭的含量实时监控整个 PCR 反应的进程。之后经过不断的研究，通过对 PCR 反应的数学函数关系、相应的算法以及对标准品的运用，就可以对待测样品中的目标基因进行准确定量。 1996 年 1996 年 ABI 公司推出世界上第一台定量 PCR 仪 7700 型。设备由荧光定量系统和计算机组成，通过荧光染料或荧光探针，对 PCR 产物进行标记跟踪，结合相应的软件对结果进行分析，可以实现计算待测样品
了我的扩增曲线呢？ 其实，这种现象并不是偶发的，有很多原因可能导致，并且有个专属名称「Hook Effect」，翻译过来叫「鱼钩效应」。「鱼钩效应」指在荧光定量 PCR 过程中，DNA 扩增到指数增长期后出现的一种荧光信号不能保持稳定（或者上升）而出现下降的现象 [1]。 导致扩增曲线出现这一现象的因素比较复杂，这里我们分别从嵌入性染料法与探针法两种定量方式的角度为大家解释： 嵌入性染料法： 嵌入性染料法（例如 SYBR Green I）产生「鱼钩效应」主要是由于模板序列混杂，在 PCR
Real-time qPCR 手册——手把手教你从菜鸟到高手
TaqMan@探针和分子信标，利用与靶序列特异杂交的探针来指示扩增产物的增加；一类为非探针类，其中包括如 SYBR@Green I 或者特殊设计的引物(如 LUX @Primers ) 通过荧光染料来指示产物的增加。 3.1 Taqman@探针法 Taqman@探针是最早用于定量的方法。就在 PCR 扩增时加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸：5’端标记一个报告荧光基团，3’端标记一个淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收，也就是 FRET 反应
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