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- JNO-A17-845
- 2026年01月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
99
- 细胞类型：
科研
- 物种来源：
鼠/人/其它
- 细胞形态：
上皮样/成纤维样/其它
- 运输方式：
常温运输/干冰运输
- 生长状态：
贴壁/悬浮
- 规格：
25T
细胞常规说明：
培养条件：89%基础培养基+10%FBS+1%双抗
冻存液成分：10%DMSO+40%FBS+50%基础培养液
细胞质检情况：不含细菌、真菌、支原体等微生物污染
传代建议：1:2~1:3传代，2~3天换液1次
特别提醒：签收细胞后，如细胞状态不佳，或培养中遇到问题，烦请当天尽快联系，以便处理。当天及时反馈细胞情况和细胞照片是售后跟踪处理重要的参考依据，请务必重视。
悬浮细胞接收后的操作流程与注意事项
1.如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室
2.拧松瓶盖，细胞瓶竖立培养8h（或过夜）
3.待细胞沉底后吸除上层液体（含碎片残渣，请小心操作），然后吸取沉底的细胞层（2ML左右转移到新的培养瓶，加入新鲜的完全培养基（如细胞状态较差可将血清浓度调高到15%）继续培养
悬浮细胞常规培养传代流程（请严格遵照无菌操作）
1.将培养瓶/皿中的细胞重悬混匀
2.吸取2/3或者一半混匀后的细胞悬液到新的培养瓶/皿
3.分别在原瓶/皿和新分瓶的培养瓶/皿加入等量或者2倍的新鲜培养基，使细胞密度保持在5 X10(5) /ml左右
4.注意培养基PH值变化情况和细胞密度，定期半量换液（每周2-3次），待细胞密度大于2 X 10(6) /ml以后重复1项操作或者冻存
贴壁细胞接收后的操作流程与注意事项
1.收到细胞当天尽快更换新鲜完全培养基，第二天再进行消化处理
2.如果细胞收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态，请将悬浮的细胞即时离心，加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养观察。同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基，培养观察
3.若出现生长不均：贴壁细胞若出现分布不均，成岛状生长，可将细胞进行消化，重悬打散细胞，加入新鲜培养基进行培养
贴壁细胞常规培养传代流程（请严格遵照无菌操作）
1.吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加适量0.25%胰酶进行消化细胞（注意把握消化时间）
2.镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（不建议消化到细胞漂浮）去掉胰酶，加6~8ml 完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散
3.取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养
4.注意培养基PH值变化情况，定期换液（每周2-3次），待细胞密度达到80%以后重复1项作或者冻存
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文献和实验由江上不二夫等从米曲霉（Aspergillus oryz-ae）的高峰淀粉酶中分离提纯的、具有鸟嘌呤特异性的核糖核酸酶，缩写为 RNA酶 T1 ． EC3． 1． 4． 8。分解 RNA时首先可逆地切断与 3′ -鸟苷酸残基相邻的核苷酸间磷酸二酯键，中间形成具 2′， 3′ -cGMP和以 2′， 3′ -cGMP为末端的寡核苷酸，随之进行不可逆的解而产生以 3′ -GMP和以 3′ -GMP为末端的寡核苷酸。自从 R． W． Holley等人用此酶决定 tRNA的核苷酸排列以来，它成为
RNase A/T1 mapping provides a sensitive and quantitative method of expression analysis of known gene sequences. It differs from primer-derived analyses such as primer extension and reverse transcriptase-PCR by the use of a probe
相关专题 RNA酶T1为一内切核糖核酸酶 。它特异地作用于鸟嘌呤核苷酸3"端磷酸并切割与相邻核苷酸相连的磷酸二酯键。反应的终产物为鸟嘌呤核苷3"磷酸及末端带鸟嘌呤核苷3"磷酸的寡核苷酸(Davidson 1972)。 用途 去除DNA-RNA杂交体中未杂交的RNA区。
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