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文献和实验酶组织化学酶显示方法 1.偶联偶氮色素法 此法又称偶氮色素法(couplingazo dyemethod),是指用某种人工合成底物在酶作用下产生分解产物,分解产物与重氮盐结合,引起偶联偶氮反应,形成不溶性偶氮色素,以此对酶定位。常用的底物是萘酚系列化合物,如l―萘酚、2―萘酚、6―溴―2―萘酚、萘酚AS、萘酚AS衍生物等。由于重氮盐的种类不同,偶氮色素的颜色也不同,可显示出紫色、蓝色、红色、褐色、棕色和黑色等各种颜色。 重氮盐有不同程度的抑制酶活性作用,因此必须选择抑制作用最弱
mM咪唑)悬浮,100ml用5~10ml缓冲液(约当2~5ml每克菌量),视悬浮后的菌液浓度而定;5、反复冻融法破碎细胞:做到14步时由于时间原因不能立即继续后面的操作,可将菌悬液放于-70℃冰箱中冷冻;也可用反复冻融的方法来破碎细胞,在-70℃冻融,在室温下溶解,反复冻融3~4次;6、加Lysozyme至1mg/ml(1ml加10ul),在冰上孵育30min~1h;7、200~300W超声破碎,2s×30次,停顿2s;若菌种较多可以增加破碎次数。注意超声破碎时间,不可太长,否则温度升高易导致蛋白
一、MTT 是什么MTT 是一种粉末状化学试剂,全称为 3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide,汉语化学名为 3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐,商品名:噻唑蓝。是一种黄颜色的染料。二、MTT 法用来做什么简单地说:是一种检测细胞存活和生长的方法。MTT 主要有两个用途1.药物(也包括其他处理方式如放射线照射)对体外培养的细胞毒性的测定;2.细胞增殖及细胞活性测定。三、为何 MTT
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