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- HZ0020
- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
半年
- 英文名：
pET-25b
- 库存：
200
- 供应商：
沪震生物
- 规格：
5ug
pET-25b
产品信息
| 产品货号 | 产品名称 | 产品规格 | 优惠价 |
|---|---|---|---|
| HZ0020 | pET-25b | 5μg |
¥请询价 |
使用说明
沪震质粒平台的各批次质粒菌株发货前均经过严格的多重验证，如存在质量问题，请在收到产品的三个月内通知我司。收到质粒后请短暂离心，取2μl转化至对应感受态中，挑取单克隆重新提取质粒后使用。
基本信息
| 启动子: | T7/lac |
|---|---|
| 复制子: | ColE1 ori，F1 ori |
| 终止子: | T7 terminator |
| 质粒分类: | 大肠杆菌质粒；大肠表达质粒；pET系列质粒 |
| 质粒大小: | 5547bp |
| 质粒标签: | N-pelB, C-HSV, C-6×His |
| 原核抗性: | 氨苄青霉素Amp（100μg/ml） |
| 克隆菌株: | DH5α等大肠杆菌 |
| 培养条件: | 37℃，有氧，LB |
| 表达宿主: | BL21(DE3)等大肠杆菌 |
| 诱导方式: | IPTG或乳糖及其类似物 |
| 5'测序引物: | T7（TAATACGACTCACTATAGGG） |
| 3'测序引物: | T7-ter（TGCTAGTTATTGCTCAGCGG） |
| 备注: | 分泌表达 |
质粒简介
pET-25b质粒是一种原核表达载体，C端含有一个6×His标签、HSV标签，N端含有一个pelB前导肽。该质粒含有多个常用的酶切位点，便于不同基因克隆。表达由宿主细胞提供的T7 RNA聚合酶诱导，目的基因被克隆到质粒载体上，受噬菌体强转录及翻译信号控制。pET25b载体的单一的多克隆位点见上面的环状质粒图谱。注意：载体序列是以pBR322质粒的编码规矩进行编码的，所以T7蛋白表达区在质粒图谱上面是反向的。T7 RNA聚合酶启动的克隆和表达区域在质粒图谱中也被标注了出来。质粒的F1复制子是被定向的，所以在T7噬菌体聚合酶的作用下，包含有蛋白编码序列的病毒 粒子能够产生，并启动蛋白表达，同时蛋白表达将被T7终止子序列的作用下终止蛋白翻译。
pET系统是有史以来在大肠杆菌中表达重组蛋白的功能最强大的系统，也是现今原核表达方面使用最广泛的系统。该系列质粒能很容易的通过降低诱导物的浓度来削弱蛋白表达。在非诱导条件下，可以使目的基因处于完全沉默状态而不转录。
pET系统是有史以来在大肠杆菌中表达重组蛋白的功能最强大的系统，也是现今原核表达方面使用最广泛的系统。该系列质粒能很容易的通过降低诱导物的浓度来削弱蛋白表达。在非诱导条件下，可以使目的基因处于完全沉默状态而不转录。
质粒图谱
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载体pET-25b
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