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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
半年
- 英文名:
pET28a-EYFP
- 库存:
200
- 供应商:
沪震生物
- 规格:
5ug
pET28a-EYFP
产品信息
| 产品货号 | 产品名称 | 产品规格 | 优惠价 |
|---|---|---|---|
| HZ0027 | pET28a-EYFP | 5μg |
¥请询价 |
使用说明
基本信息
| 启动子: | T7/lac |
|---|---|
| 复制子: | ColE1 ori,F1 ori |
| 终止子: | T7 terminator |
| 质粒分类: | 大肠系列质粒;大肠荧光质粒;大肠黄色质粒 |
| 质粒大小: | 6065bp |
| 质粒标签: | N-6×His, N-Thrombin, N-T7,N-EYFP, C-6×His |
| 原核抗性: | 卡那霉素Kan(50μg/ml) |
| 克隆菌株: | DH5α等大肠杆菌 |
| 培养条件: | 37℃,有氧,LB |
| 表达宿主: | BL21(DE3)等大肠杆菌 |
| 诱导方式: | IPTG或乳糖及其类似物 |
| 5'测序引物: | T7(TAATACGACTCACTATAGGG) |
| 3'测序引物: | T7-ter(TGCTAGTTATTGCTCAGCGG) |
质粒简介
pET系统是有史以来在大肠杆菌中表达重组蛋白的功能最强大的系统,也是现今原核表达方面使用最广泛的系统。该系列质粒能很容易的通过降低诱导物的浓度来削弱蛋白表达。在非诱导条件下,可以使目的基因处于完全沉默状态而不转录。
质粒图谱
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文献和实验dmdfe 本人将GFP基因后面加了一段大约110bp的序列,插入PET28A的BamH1和Hind3位点,最后在BL21中表达。 经SDS-PAGE验证表明: 目的蛋白 大量存在菌体裂解后沉淀即包涵体中,但是该沉淀无色。 少量存在于上清中,上清显微弱的绿色。 看文献大量报道GFP融合蛋白几乎都形成可溶性表达,目的蛋白在上清中,并且诱导条件没有太大要求。 想请教一下各位做过GFP原核表达的经验
for itch sensation. [腺相关病毒, 痒, 光遗传,化学遗传]注射部位:小鼠PBN载体:AAV-hSyn-HA-hM4Di-IRES-mCitrine血清型:AAV2/9病毒滴度:1.0× 1013 VG/mL注射体积:150nl观察时间:3周2.基于AAV的逆向非跨突触标记—rAAV2-retro 注射部位:小鼠BPN载体:rAAV2-retro-hSyn-EYFP观察时间:4周3.基于AAV的跨突触标记3.1 基于AAV的顺向跨突触标记-- rAAV2/1 ① 客户发表文章:Nature
Sun’s lab. Science 2017[1]注射部位:小鼠脊髓载体:AAV-EF1a-DIO-ChR2(H134R)-mCherry& AAV-hSyn-eNpHR3.0-EYFP血清型:rAAV2/9病毒滴度:5.1× 1012 VG/mL&1.7× 1013 VG/mL注射体积:400-600nl Zhong Chen’s lab. Nat Commun, 2020[2]注射部位:PV-Cre小鼠的SNr区载体:PV-Cre: AAV-EF1a-DIO-ChR2(H134R
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