载体pCold-SUMO

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  • ¥800 - 1380
  • HZbscience
  • 中国/美国/德国
  • HZ0077
  • 2025年07月16日
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    • 详细信息
    • 技术资料
    • 保存条件

      -20℃

    • 保质期

      半年

    • 英文名

      pCold-SUMO

    • 库存

      200

    • 供应商

      沪震生物

    • 规格

      5ug

    pCold-SUMO

    产品信息

    产品货号 产品名称 产品规格 优惠价
    HZ0077 pCold-SUMO

    5μg

    ¥请询价

    使用说明

    沪震质粒平台的各批次质粒菌株发货前均经过严格的多重验证,如存在质量问题,请在收到产品的三个月内通知我司。收到质粒后请短暂离心,取2μl转化至对应感受态中,挑取单克隆重新提取质粒后使用。

    基本信息

    启动子: CspA promoter
    复制子: ColE1 ori,f1 ori
    质粒分类: 大肠系列质粒;大肠表达质粒;pCold系列质粒
    质粒大小: 4740bp
    质粒标签: N-His, N-SUMO
    原核抗性: 氨苄青霉素Amp(100μg/ml)
    克隆菌株: DH5α等大肠杆菌
    培养条件: 37℃,有氧,LB
    表达宿主: BL21等大肠杆菌
    诱导方式: IPTG或乳糖及其类似物
    5'测序引物: pCold-F(ACGCCATATCGCCGAAAGG)
    3'测序引物: pCold-R(GGCAGGGATCTTAGATTCTG)
    备注: 冷休克表达载体

    质粒简介

    原核表达载体(pCold-SUMO)是在 pCold 载体基础上改造而成,该载体启动子(CS Promoter)来源于南极嗜冷细菌,在低温下(15 度)才能启动蛋白的表达。低温下细菌生长缓慢,使得蛋白合成速度减慢,从而最大限度的提高了蛋白正确折叠的几率,提高了蛋白可溶性表达,增强了活性蛋白的表达比率。该表达系统所包含的 SUMO tag可以极大地提高小分子量蛋白的表达量,而且进一步提高了蛋白的可溶表达几率。同时,试剂盒配备的SUMO Protease(含6×His标签)可特异性去除 SUMO tag,从而得到不含任何标签的重组蛋白。TEE信号肽可增强冷启动子调控下目的蛋白的高表达。BL21(DE3)Chaprone E.coli 细菌中含有分子伴侣蛋白质粒,其表达产物可协助重组蛋白正确折叠形成可溶活性蛋白。分子伴侣蛋白质粒为氯霉素抗性(chloramphenicol,Cmr)的表达受控于四环素(tetR)操纵子。
    pCold-SUMO质粒是利用冷休克基因CSPA启动子设计高效率蛋白质表达载体。在E.COLI启动子下游处,插入了lac操纵子,以便严格控制表达。此外,5’非翻译区(5’UTR),翻译增强元件(TEE),His标签序列,Xa因子切割位点和多克隆位点(MCS)位于CAPS启动子的下游。当培养温度切换到低温时,大肠杆菌暂时停止生长,大部分的大肠杆菌蛋白质表达减少,但是一类称为冷休克蛋白的蛋白质被特异性诱导表达。

    质粒图谱

    载体pCold-SUMO
    载体pCold-SUMO

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