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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
半年
- 英文名:
pCold-SUMO
- 库存:
200
- 供应商:
沪震生物
- 规格:
5ug
pCold-SUMO
产品信息
| 产品货号 | 产品名称 | 产品规格 | 优惠价 |
|---|---|---|---|
| HZ0077 | pCold-SUMO | 5μg |
¥请询价 |
使用说明
基本信息
| 启动子: | CspA promoter |
|---|---|
| 复制子: | ColE1 ori,f1 ori |
| 质粒分类: | 大肠系列质粒;大肠表达质粒;pCold系列质粒 |
| 质粒大小: | 4740bp |
| 质粒标签: | N-His, N-SUMO |
| 原核抗性: | 氨苄青霉素Amp(100μg/ml) |
| 克隆菌株: | DH5α等大肠杆菌 |
| 培养条件: | 37℃,有氧,LB |
| 表达宿主: | BL21等大肠杆菌 |
| 诱导方式: | IPTG或乳糖及其类似物 |
| 5'测序引物: | pCold-F(ACGCCATATCGCCGAAAGG) |
| 3'测序引物: | pCold-R(GGCAGGGATCTTAGATTCTG) |
| 备注: | 冷休克表达载体 |
质粒简介
pCold-SUMO质粒是利用冷休克基因CSPA启动子设计高效率蛋白质表达载体。在E.COLI启动子下游处,插入了lac操纵子,以便严格控制表达。此外,5’非翻译区(5’UTR),翻译增强元件(TEE),His标签序列,Xa因子切割位点和多克隆位点(MCS)位于CAPS启动子的下游。当培养温度切换到低温时,大肠杆菌暂时停止生长,大部分的大肠杆菌蛋白质表达减少,但是一类称为冷休克蛋白的蛋白质被特异性诱导表达。
质粒图谱
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文献和实验点突变 蛋白修饰 载体设计怎么做?磷酸化/乙酰化/乳酸化对照表收好
个化学基团"来开关功能,这个过程叫翻译后修饰(PTM),常见有磷酸化、乙酰化、乳酸化、SUMO 化、糖基化等。要在实验里研究某个修饰位点的作用,最常用办法是在载体上做点突变:把该位点的氨基酸换成"模拟修饰"或"去除修饰"的残基,再看过表达后的功能变化。说白了,你没法直接给细胞加一个磷酸基,但你能造一个"看起来像被磷酸化"的蛋白变体,来推断这个修饰干了什么。 突变载体在细胞里怎么验证功能 设计位点 → 构建点突变过表达载体(通常带标签如 FLAG/HA/EGFP)→ 病毒或质粒送进细胞 → 检测下游
-1 PCDFDuet-1 PACYC184 PproexhtA PproexhtB PCold I PCold II PCold-tf PColdI-sumo PBV220
需求,包括各种最新型的标签,如:SNAP-Tag™、Halo Tag™、AviTag™、Sumo等;也提供齐全的各种常用标签,如eGFP、His、Flag等等标签。 以下是部分蛋白标签的特性介绍,更加详细的介绍可在查询克隆产品的结果列表里面看到各种推荐的蛋白标签和载体 。 TrxHIS His6是指六个组氨酸残基组成的融合标签,可插入在目的蛋白的C末端或N末端。当某一个标签的使用,一是能构成表位利于纯化和检测;二是构成独特的结构特征(结合配体
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