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- 2025年07月16日
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低温运输,-20℃保存
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半年
- 英文名：
RecJf Exonulease
- 库存：
大量
- 供应商：
康朗生物
- 规格：
1000U
RecJf核酸外切酶
英文名：RecJf Exonulease规格：1000U
产品简介:
RecJf 作用于单链 DNA,沿 5" →3" 方向催化去除单磷酸脱氧核苷酸。RecJf 与麦芽糖结合蛋白 (MBP) 融合表达。其催化特性与野生型 RecJ 相同。与MBP的融合,增强了 RecJf 的溶解度。当底物为 5" 端突出了 22 个核苷酸的 DNA 时,经RecJf 酶切后可得到含有以下三种末端的混合产物:平齐末端、5" 突出末端 (1-5 个核苷酸)和5" 凹陷末端 (1-8 个核苷酸) 。RecJf 发挥活性时无需 5"末端磷酸化。
具体有下列特点:
1 .特异性 5" →3" 单链 DNA核酸外切酶
2.从 DNA 上切下单磷酸脱氧核苷酸
反应条件:
1X Buffer 2 [50 mM NaCl,10 mM Tris-HCl,10mM MgCl2,1 mM DTT(pH 7.9 @ 25℃)],37℃ 温育。
单位定义
1 单位指在 50 μl 反应体系中,37℃ 条件下,30 分钟内产生 0.05 nmol 可溶于 TCA 的脱氧核糖核苷酸所需要的酶量。
Buffer 成分:
10 mM Tris-HCl,50 mM KCl,1 mM DTT,0.1 mM EDTA,200μg/ml BSA,50% Glycerol,pH 7.4 @ 25℃
热失活:
65℃ 20分钟。
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,有效期半年。
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文献和实验在核酸水解酶中，是具有从分子链的末端顺次水解磷酸二酯键而生成单核苷酸作用的酶，与核酸内切酶相对应。可大致分为水解磷酸二酯键的 3′端生成 5′ -单核苷酸的酶，及水解 5′端生成 3′ -单核苷酸的酶。前者有蛇毒磷酸二酯酶及大肠杆菌核酸外切酶Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ等；后者有脾脏磷酸二酯酶、嗜酸乳杆菌（ Lac-tobacillus acidophilus）核酸酶。这些酶中还可以区别出从分子链的 3′末端或 5′末端开始切断和对单链 DNA或双链 DNA具有特异作用的酶。可利用这些酶水解
脾脏核酸外切酶spleen exonuclease，spleenphosphodiesterase
亦称脾脏磷酸二酯酶（spleen phosphodieste- rase）。系将具有 5′ -OH末端的 DNA和 RNA，从 5′末端向 3′方向不断使 3′ -核苷酸游离分解的酶。 EC3． 1． 16． 1。常从牛脾脏提纯的此种酶。高分子 DNA不易水解，但用 DNaseⅡ或普氏微球菌（ Micrococ-cus pyogenes）核酸酶处理，则可以完全水解。对碱基序列无特异性，但在 5′末端有磷酸单酯基则不水解。反应不需要 Mg2 ，但最适 pH在有 2× 10
率。 核酸酶污染的过夜鉴定 所有的限制性内切酶 与1μg 底物DNA在50μl反应体系中，采用推荐的NEBuffer温育过夜。比较酶切1小时的特征带型和过夜酶切的带型。如果两种情况下带型均明显、没有改变，则说明测试的酶中不存在非特异性的DNA酶。我们报道了可以温育过夜的最大酶单位数。 核酸外切酶污染鉴定 所有的限制性内切酶与1μg 单双链混合的、3H标记的E.coli DNA (200,000 cpm/μg)在50μl反应体系中
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