核酸内切酶III(Nth)

核酸内切酶III(Nth)

规格：1000U
英文名：Endonuclease III(Nth)
产品简介:
E.coli 核酸内切酶 III (Nth) 既有 N-糖基化酶活性也有 AP-裂解酶活性,占E.coliAP酶总活性的90%。N-糖基化酶活性可释放双链 DNA 上受损的嘧啶碱基,产生一个脱嘧啶 (AP) 位点。AP-裂解酶活性则切割 AP 位点的 3" 端,产生一个 5" 磷酸和一个3" 磷酸-α,β不饱和醛。被核酸内切酶 III 识别并切除的受损碱基包括:尿素、5,6 二羟基胸腺嘧啶、胸腺嘧啶乙二醇、5-羟基-5-甲内酰脲、尿嘧啶乙二醇、6-羟基-5,6-二羟基胸腺嘧啶和甲基羟丙二酰脲。
具体有下列特点:
1.单细胞凝胶电泳 (彗星试验),彗星试验的推荐稀释倍数1:104〜1:105
2.碱性析出
3.碱解旋
反应条件:
1X Endonuclease III (Nth) 反应缓冲液 [20 mM Tris-HCl,1 mM EDTA,1mM DTT (pH 8.0 @ 25℃) ], 37℃ 温育。
单位定义:
1 单位指在 10 μl 缓冲液体系中,37℃ 条件下,1 小时内能够切割 1 pmol 含一个 AP 位点*的 34 bp 寡核苷酸双链所需要的酶量。 AP 位点的创建方法如下:37℃条件下,用 1 单位尿嘧啶-DNA糖基化酶 (UDG)处理 10 pmol 含单一尿嘧啶碱基的34 bp 寡核苷酸双链 2 分钟。
Buffer 成分:
10 mM Tris-HCl,250 mM NaCl,1 mM DTT,0.1 mM EDTA,200μg/ml BSA,50% Glycerol
热失活:
65℃ 20 分钟。
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,有效期一年。