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文献和实验相关,正在埋头苦干的你是否也在研究自噬呢?是否仍在「迷宫」般的信号通路中迷失自我呢?下面,我们梳理了自噬中的关键蛋白,希望让你的研究思路更加清晰。一个完整的自噬包括自噬启动、自噬体形成、自噬溶酶体形成,降解及再利用。参与的主要蛋白复合物包括:ATG1/ULK 蛋白激酶复合物、PI3K 蛋白激酶复合物、ATG8 泛素样蛋白结合系统、ATG12 泛素样蛋白结合系统以及 ATG9 循环系统。开启自噬参与者:ATG1/ULK 复合物、PI3K 复合物、LC3 募集以及 p62 的结合Beclin 1 是 Ⅲ 类
。 HRP 经 NaIO 4氧化后形成的醛化酶可与抗体分子的氨基相连,形成斯夫氏硷,后者可进一步用 NaBH 4 ( 或乙醇胺 ) 还原生成稳定的酶标记抗体。 2. 标记步骤 : (1) 称取 5mgHRP 溶解于 1ml 蒸馏水中。 (2) 于上液中加入 0.2ml 新配的 0.1M NaIO 4溶液,室温下避光搅拌 20 分钟。 (3) 将上述溶液装入透析袋中,对 1mM PH4.4 的醋酸钠缓冲液透析, 4 ℃过夜。
:10μL 结果:所有组分在19min之内全部流出,各组分完全分离,组分流出顺序为:峰1为菜籽甾醇保留时间13.70min,峰2为胆固醇保留时间14.62min,峰3为豆甾醇保留时间15.45min,峰4为菜油甾醇保留时间15.97min,峰5为β-谷甾醇保留时间17.05min。 例12.甾族化合物分析 样品:含孕酮等4种物质的混合物 色谱仪:“南京科捷LC600”液相色谱仪,四元梯度泵,色谱工作站 检测器:MarkⅡA型
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