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- 2025年10月31日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
ADCC Reporter Bioassay, Target (Raji)
- 供应商：
普洛麦格
- 规格：
1 each
说明：
ADCC Reporter Bioassay, Target Kit (Raji) (ADCC 报告基因生物检测系统， Raji 靶细胞试剂盒 )。试剂盒中提供了两个进行 ADCC报告基因生物检测的对照组分： Raji 靶细胞和对照抗体 anti-CD20，
供用户在实验中进行 ADCC 报告基因生物检测系统的性能验证。ADCC ( 抗体依赖性细胞介导的细胞毒性作用 ) 是抗体作用的一种活性机制 (MOA)，病毒感染的细胞或其他病变细胞通过该机制
被识别进而被细胞介导的 免疫系统组分杀伤。是目前抗体药物研发的重要机制之一。 ADCC Reporter Bioassay 应用基因工程改造的Jurkat 效应细胞进行扩增和建库，应用生物发光法，通过测量 NFAT信号通路的活化，定量检测治疗性抗体 Fc 效应因子功能。强大的优化的检测体系，误差更低，更加精确。检测最快可在一天内完成，操作更加简便快速。这些特性使得 ADCC 报告基因检测试剂盒适用于抗体药物的研究，开发和产品的批签发检测 (lot release)。ADCC 是利用抗体介导药物杀伤靶癌细胞的理想机制。抗体与细胞表面上的目标抗原结合 ( 下图 1)。如果抗体的 Fc 段同时结合到效应细胞 ( 主要为自然杀伤细胞， Natural Killer Cells) 表面的 FcγRIIIa 受体上，两种类型的细胞即发生多重交联，导致 ADCC 作用机制通路的激活。靶细胞的杀伤是此活化途径的终点，这一指标被用在经典的 ADCC 生物活性检测中，这些经典的检测方法利用供者的外周血单核细胞 (PBMCs) 或自然杀伤 (NK) 细胞亚群作为效应细胞。这些细胞的应答变异性很大，难于制备，并容易引起很高的背景读数。ADCC Reporter Bioassay 选择了 ADCC 作用机制通路激活过程中较早的事件作为检测的读出指标：即效应细胞中由 NFAT ( 活化 T细胞核因子 ) 通路介导的基因转录的激活。此外， ADCC 报告基因检测试剂盒使用工程改造的 Jurkat 细胞作为效应细胞，该细胞稳定表达了 Fcγ RIIIa 受体 (V158 高亲和力突变体 ) 和由 NFAT 应答元件驱动表达的萤火虫萤光素酶。抗体在 ADCC 作用机制中的生物活性通过 NFAT 通路活化产生的萤光素酶定量，而效应细胞中的萤光素酶活性通过生物发光读数定量。检测的信号值高，且背景很低。ADCC Reporter Bioassay 具有生物活性检测所必需的明确的特异性 ( 图 3，见 P34)。只有同时具备带有正确表面抗原的靶细胞、正
确的特异性抗体及表达 FcγRIIIa 的效应细胞时才会获得良好的检测应答，其中任一缺失都不能产生应答。ADCC Reporter Bioassay 是一种适用于抗体药物发现、开发和生产整个流程的生物活性检测方法。其检测结果稳定，并且具有批签发检测所要求的精度和准确度。此外，该法可用于定量检测在ADCC 作用机制中糖基化差异对抗体 Fc 段效应因子功能的影响，这对于 ADCC 效率变异分析非常有帮助。很重要的一点是 ADCC Reporter Bioassay 能够实现与经典 LDH释放的 ADCC 实验相当的抗体活性测定功能 ( 图 2)。
特点：
• 均质检测，简单方便： 减少实验组间变异性。
• 生物发光法： 灵敏，信噪比高。
• 基于 ADCC 作用机制研发： 与已有 ADCC 细胞毒性检测相关，并可替代已有检测。
• 灵活： 可调整至 384 孔板模式。
• 已使用 FDA- 批准的抗体进行验证。
• 适用于药品批签发的质量控制： 指示稳定性，卓越的线性度、准确度和精度。
注意： 试剂盒中组分会由于保存温度不同而被分开运输。
储存条件： ADCC Bioassay 靶细胞以干冰运输。阳性对照抗体 AntiCD20 以胶冰运输。客户在收到 ADCC 效应细胞系后要迅速将细胞储存于 -140℃条件下 ( 冰箱或液氮的气相 ) 长期保存。细胞敏感，操作需小心。出于安全的考虑，不要将细胞浸于液氮液面下。阳性对照抗体 Anti-CD20 于 4℃保存。
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文献和实验【申请上传】Current Protocols in Immunology
Measurement of Soluble and Membrane-Bound Interleukin 1 Using a Fibroblast Bioassay Unit 6.3 Measurement of Human and Murine Interleukin 2 and Interleukin 4 Unit 6.4 Measurement of Interleukin 3 and Other Hematopoietic Cytokines, such as GM-CSF, G-CSF, M-CSF
Selecting, Acquiring, and Using Small Molecule Libraries for High‐Throughput Screening
Literature Cited Ambesi‐Impiombato, A. and di Bernardo, D. 2006. Computational biology and drug discovery: From single‐target to network drugs. Curr. Bioinform
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