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上海一基实业有限公司
【编号】:YJE0602产品货源充足,质量保证,本公司产品仅供科研实验使用,不得用于临床或食用!可供:ELISA试剂盒,PCR恒温荧光测试盒、无菌采制动物血清、辐照灭菌动物血清、无菌过滤动物血清、脱纤维动物血清、抗凝动物血清、动物血浆等系列产品。如需产品详细说明等物理性质信息请联系客服为您查询!另售各类进口品牌试剂:Sigma试剂、ASROS试剂、AIFA试剂、alding试剂、Fisher试剂、日本MBL试剂、美国剑桥CIL氘代试剂、ATCC菌株等品牌产品。购买时请联系客服索要说明书。联系方式:可直接致电客服电话,可点击当前页面QQ图标进行临时对话,也可在留言框发布留言,我们收到后会及时沟通。
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文献和实验加入适量红细胞裂解液裂解红细胞(可加入 500 μL 1× 红细胞裂解液重悬细胞,室温裂解 2 min 后,立马加入 10 mL PBS,300 g 离心 5 min 后弃上清)。 若提取的腹腔巨噬细胞需培养,请注意无菌操作。 收集腹水时,从小鼠左侧(肠道较多)注射 PBS,从右侧(器脏较大)抽腹腔灌洗液,注意不要扎到器脏。 小鼠腹腔灌洗液收集细胞比较脆弱,加细胞染色缓冲液有利于细胞的保存,但建议当天及时检测。 小鼠腹腔灌洗液中大多数为巨噬细胞,巨噬细胞检测需要封闭Fc受体,此时可使用小鼠 CD16/32纯
。 加入2 mL 1×红细胞裂解液重悬细胞,室温裂解2~3 min后,立马加入10 mL PBS,300 g离心5 min,弃上清。 用细胞染色缓冲液重悬脾脏细胞,将细胞悬液用200目筛网再次过滤后计数, 并调整细胞浓度至1×107/mL。 b) 吹打法 小鼠颈椎脱臼处死,置于75%乙醇浸泡5 min后,取出小鼠,置于无菌操作台上,左腹侧朝上。 小鼠左腹侧中部剪开小口,撕开皮肤,暴露腹壁,可见红色长条状脾脏。 脾脏下侧提起腹膜,剪开后上翻,暴露出脾脏,用镊子提起脾脏,眼科剪分离脾脏下面
),剪去两端软骨,露出红色的骨髓腔。注意在该过程中应保留尽可能多的骨髓腔。 拿一支1 mL的无菌注射器,吸取1 mL PBS,轻轻插入骨髓腔,冲洗骨髓腔以获得骨髓。重复2~3次,可冲出绝大部分细胞。冲洗完后,用移液器轻轻吹打细胞,将细胞团吹散。 将冲洗液用200目的滤网过滤,滤液收集于15 mL离心管中,300 g离心5 min,弃上清。 用细胞染色缓冲液重悬细胞,细胞计数,并调整细胞浓度至1×107/mL。 注意事项: 骨髓样本细胞分群明显,可以裂解红细胞,也可不裂解。如需裂解红细胞,可以加入
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