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- HZ0002
- 2025年07月15日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20摄氏度保存
- 保质期：
1年
- 库存：
大量
- 供应商：
上海沪震生物科技有限公司
pcDNA3.1-EGFP（N端可插入基因）产品信息
订购信息
| 货号 | 载体名称 | 出品公司 | 载体用途 | 价格 | 到货周期 |
| HZ0002 | pcDNA3.1-EGFP（N端可插入基因） | 哺乳动物表达载体 | 1000 900 |
现货 |
产品参数
载体用途：哺乳动物表达载体
原核抗性：Ampicillin (氨苄青霉素)
真核筛选标记：Neomycin / G418
启动子：CMV promter
MCS：参见质粒图谱
表达水平：高
荧光标记：绿色荧光（EGFP）标记
5' 测序引物：CMV-f
3' 测序引物：pEGFP-N-3'、BGH-r
载体拷贝数：高
载体描述
- 此载体骨架为沪震公司的pCDNA3.1(+)。
- EGFP插入位点为EcoRI、NotI。
- 此载体已验证：将此载体转染至293细胞、Hela细胞、CHO细胞等多株细胞，24小时后观察荧光，可见多且亮的绿色荧光。
- 此载体可作为pCDNA3.1(+)系列的NC对照载体使用，亦可用来构建【目的基因-EGFP基因】融合形式的基因过表达载体。
- 此载体带有Neo抗性基因，可在真核细胞中用G418进行筛选。
Location of features
232-819：CMV promoter
995-1718：EGFP
1773-1997：BGH polyA
2043-2471：f1 ori
2476-2819：SV40 promoter
2881-3675：Neo(R)
3849-3979：SV40 polyA
4362-5032：pUC ori（反向）
5177-6037：Amp(R)（反向）
6038-6136：bla promoter（反向）
Primer
CMV-f（通用引物）：769-789
Sequence：5’-CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG-3’
BGH-r（通用引物）：1784-1767
Sequence：5’-TAGAAGGCACAGTCGAGG-3’
Propagation in E.coli
- DH5α、JM101、XL1-Blue等均可。
- 抗性为Amp+。
- Copy number：高（~500）
质粒图谱
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文献和实验1、质粒的概念 质粒（Plasmid）是一种存在于细菌、酵母等微生物细胞中的小型环状双链 DNA 分子，能够独立于宿主染色体进行自我复制，并通常携带对宿主生存非必需但具有特定功能的基因（如抗生素抗性基因）。质粒是分子生物学和基因工程中最重要的工具之一。 质粒根据其用途可以分为多种不同的类型，如用于保存序列信息的克隆质粒（如：pUC 系列质粒），用于表达蛋白的质粒（如哺乳动物细胞表达所用的 pcDNA3.1 系列质粒），用于基因编辑的质粒（如哺乳动物细胞基因编辑所用的 espCas9-2A
也可以，这样用一个启动子CMV同时表达两个蛋白，而不是融合蛋白。 liuyicheng84427 VEGF应该加在GFP的N端还是C端？ lmnsmu VEGF加在GFP的N端或C端均可以，而且有一些载体如pEGFP-N1或pEGFP-C1在N端或C端已经有GFP的序列，只需将你的目的基因序列插入到MCS区即可融合表达。 naj2007 多谢大家！ hiqihong
(Klenow酶补平)和XbaI之间，构建重组质粒载体pGL3-EBVR。pGL3-EBVR经Bgl I1和BamH I双酶切得到SV40启动子和EBVR片段，插入pcDNA3-EGFP中CMV启动子上游BglI1位点处，构建重组质粒载体pcDNA3-EGFP-EBVR。 重组质粒载体pcDNA3-EGFP-EBNA1-MAR的构建 采用Hindin和EcoRI消化pCL，获得800 bp的人13-IFN基因上游IFN-MAR，将此片段克隆至pBluescript中，构建重组质粒载体pBlue
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