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腺病毒包装

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      上海沪震生物科技有限公司

    腺病毒包装

    腺病毒包装中的难点主要在于怎么将外源基因表达框或者外源的shRNA表达框构建至腺病毒骨架载体上。由于腺病毒骨架载体比较大(>30kb),而且载体中的一些常用酶切位点几乎都有多个,如果用常规的酶切-连接的方式将外源基因或者shRNA表达框构建至腺病毒骨架载体上,成功率很低,因此,目前的腺病毒表达系统基本上都是用同源重组的方法将外源基因或shRNA表达框构建至腺病毒骨架载体上。

    本公司的腺病毒包装出自Invitrogen公司的BLOCK-iT™ Adenoviral Expression System,与市面上其它腺病毒包装往往利用大肠杆菌或者293细胞自身的同源重组系统不同,本公司的腺病毒表达系统采用的是Invitrogen公司的Gateway技术,即利用LR重组酶进行体外重组。与其它腺病毒表达系统相比,这种体外重组更加方便、快速,重组效率更高!此外,本公司对这套腺病毒表达系统多个部分进行了优化和改造,使得整套系统适用范围更广,鉴定更方便、准确,病毒构建及包装更快捷。

    图3. 1 腺病毒骨架载体pAd/BL-DEST质粒图谱

    腺病毒骨架载体pAd/BL-DEST质粒图谱

    图3. 2 腺病毒穿梭载体pYr-adshuttle-4 (表达基因用)质粒图谱

    腺病毒穿梭载体pYr-adshuttle-4(表达基因用)质粒图谱

    图3. 3 腺病毒穿梭载体pYr-1.1(表达shRNA用)质粒图谱

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