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- 2025年12月30日
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（支原体检测试剂盒）
产品简介：
MycoTestTM Kit是利用降落聚合酶链式反应技术（TD-PCR）对支原体16S rRNA 基因高度保守区域特异性片段进行扩增检测。该方法灵敏度高，特异性强，可用于各种生物材料（如细胞培养基、实验动物分泌物、动物血清等）支原体感染的检测。
MycoTestTM Kit中所含的Mix 能特异性扩增多种支原体16S rRNA 基因片段，可以达到一次性检测多种支原体的目的。本试剂盒根据欧洲药典中对于生物制药生产过程中（参考资料：European pharmacopoeia 7.0, 2.6.7.），对于支原体的检测要求定制而成，与传统的选择性培养基培养检测方法相比较，本方法更为快速，具有高灵敏性，高特异性和高性价比。不会由于培养法检测时大量培养支原体可能带来的次级污染的问题。
产品规格：
| 组分/货号 | NA801（5 rxns） | NA802（20 rxns） |
| Mix | 160 μL | 600 μL |
| Positive | 12 μL | 22 μL |
常见支原体种类：
| 支原体种类 | 中文名称 | PCR条带大小 |
| M. orale | 口腔支原体 | 462 bp |
| M. hyorhinis | 猪鼻支原体 | 464 bp |
| A. laidlawii | 莱氏无胆甾原体 | 438 bp |
| M. salivarium | 唾液支原体 | 466 bp |
| M. arginini | 精氨酸支原体 | 465 bp |
| M. fermentans | 发酵支原体 | 461 bp |
| M. hominis | 人型支原体 | 463 bp |
| M.pneumoniae | 肺炎支原体 | 470 bp |
运输方式：
4℃
储存条件及有效期：
4℃，1个月；长期存储-20℃，12个月；
操作步骤：
1. 待检样品，直接取2 μL上清液作为PCR模板；
（注：悬浮细胞需要1000 rpm 离心4 min）
2. 反应体系配置：
| 无菌水 | 19 μL | ||
| Mix | 29 μL | ||
| 样品/对照 | 2 μL |
3. PCR反应程序：
| 94 ℃ | 90 s | |
| 94 ℃ 70-61 ℃ 72 ℃ |
30 s 30 s 45 s |
20 cycles（每2个循环降1℃，或者每1个循环降0.5℃。） |
| 94 ℃ 60 ℃ 72 ℃ |
30 s 30 s 45 s |
20个循环 |
| 72 ℃ | 4 min |
结果分析：
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文献和实验时样本之间干扰。 Q：说明书上写细胞量为 1~5 × 105 ，细胞量多的话对检测结果有没有影响？ A：建议细胞量最多不要超过 106个，过量的细胞相当于染料被稀释，影响染色和分离效果。一般 2×105 个细胞足够进行凋亡检测了，通常情况下检测 10,000 个细胞就能得到比较好的结果。 Q：是否可以用 PBS 替代凋亡试剂盒里面的 Binding Buffer？ A：不行，Binding Buffer 是必须要加的，Annexin V 与 PS 的结合依赖 Ca2+，Binding
化作用——氧分子、过氧化氢、氧自由基 5. 表面活性剂和去污剂 6.变性剂——脲和盐酸胍、高浓度盐、螯合、有机溶剂 7. 重金属离子和巯基试剂 8. 热 9. 机械力 10. 冷冻和脱水 11. 辐射 5. 酶活计算 ① 酶活定义 酶的活力单位：酶的1个活力单位是在该酶的最适条件下，在25℃、1 min内催 1μmol的底物转化为产物的酶量。 ② 定时法的计算 将酶与底物在特定条件下孵育，酶促反应开始进行，经过一定时间后，用终止液终止反应，通过化学或生物化学的方法测出底物或产物的总变化量，除以时间即可
针对同一指标，生化试剂盒和 ELISA 试剂盒的检测结果趋势是一致的吗？
一、两种方法检测原理 两种方法的基本原理都是朗伯-比尔定律，但是具体形成过程和检测的方法不一样的。 1) 生化试剂盒检测原理 生化试剂盒检测的本质就是某物质化学变化的显色反应，其反应过程可以划分为四个区：延迟区、等速区、过渡区和平衡区，以时间为横坐标、吸光度为纵坐标作图，如下所示： 延迟区：无规律可寻。 等速区：对应的是速率法，一般应用于酶活力的检测。 过渡区：对应的是固定时间法，目的是解决某些化学反应的非特异性问题，提高准确度。 平衡区：对应的是终点法，主要是测定某物质在样本中的含量。 目前
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