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- KALANG
- 中国大陆
- KL-D6402
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
低温运输,-20℃保存
- 保质期：
一年
- 英文名：
T4 RNA Ligase 1
- 库存：
大量
- 供应商：
康朗生物
- 规格：
1000U
T4 RNA连接酶 1
规格：1000U英文名：T4 RNA Ligase 1
产品简介:
催化 3"→5" 磷酸二酯键的形成,使核苷酸的5" -磷酸末端和 3"-羟基末端连接。伴随着 ATP 水解为 AMP和PPi 作用底物包括单链 RNA、DNA 及二核苷焦磷酸。
具体有下列特点:
1.连接单链 RNA和DNA
2.用 5" -[32P] pCp 进行 RNA 3" 末端标记
3.RNA和DNA 分子内及分子间的连接
4.合成单链寡脱氧核苷酸
5.蛋白质中掺入非天然氨基酸
6.无单链 DNA 核酸外切酶、核酸内切酶、RNase 以及磷酸酶污染。
活性单位定义:
1 单位指 37℃ 条件下,30 分钟内将 1 nmol 的 5" -[32P] rA16 转化成磷酸盐不溶物所需要的酶量。
反应条件:
1X T4 RNA连接酶缓冲液[50 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25℃) ,10 mM MgCl2,1 mM DTT 1mM ATP],37℃温育。
注意事项:
pCp 的连接需要加入终浓度为 10%(v/v)的 DMSO。
热失活:
65℃15分钟或煮沸2分钟。
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,有效期一年。
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文献和实验相关专题 重组DNA技术工具酶 T4 DNA Ligase即T4 DNA连接 酶，可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5’-P末端和3’-OH末端之间以磷酸二酯键结合，该催化反应需ATP作为辅助因子。同时T4 DNA连接酶可以修补双链DNA、双链RNA或DNA/RNA杂合物上的单链缺刻(single-strand nicks)。
【交流】关于NEB的T4 DNA连接酶和快速连接试剂盒的常见问题及解答
因为看到园子中使用NEB T4 DNA连接酶的老师和同学比较多，也经常就一些连接的问题进行讨论和沟通。今天发一个关于NEB T4 DNA连接酶的一个专题，就使用过程中一些常见问题跟大家讨论一下。也希望各位老师同学能够踊跃参与，如果大家有什么疑问或者好的建议欢迎。 一、关于NEB M0202 T4 DNA 连接酶的使用方法和常见问题及解答 1、产品特性和使用方法 产品说明：该酶催化契合的双链DNA或RNA的5'-磷酸末端和3'-羟基末端形成磷酸二酯键。该酶不仅能够催化平滑
使RNA的 3′－ OH末端与 5′ - 磷酸末端以磷酸二酯键而连结的酶。 EC 6． 5． 1． 3．是 J． Hurwitz等（ 1972）从感染 T4 噬菌体的大肠杆菌中提取的，与促进该噬菌体尾部纤维结合的基因 63的蛋白质为同一物质。作为其反应机理，首先是酶与 ATP形成酶 - AMP复合体，复合体的 AMP与 RNA的 5′ - 磷酸末端形成焦磷酸键，它与 RNA的 3′－ OH末端形成磷酸二酯键将 AMP游离出。一个 RNA链的 5′与 3′末端结合则生成一个环状分子。对基质
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