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- KALANG
- 中国大陆
- KL027
- 2025年07月16日
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- 技术资料
- 保存条件：
2～8℃
- 保质期：
长期
- 英文名：
Site-directed Gene Mutagenesis Kit
- 库存：
大量
- 供应商：
康朗生物
- 规格：
10次
基因定点突变试剂盒
英文名：Site-directed Gene Mutagenesis Kit规格：10次
编号：KL027
我公司生产的基因定点突变试剂盒可以用于点突变，多个邻近密码子的突变，单个或多个邻近密码子的缺失(deletion)或插入(insertion)。
本试剂盒是一个利用目前最新的基因点突变技术设计而成的试剂盒。只需通过基于PCR的突变质粒的合成，和基于Dpn I的模板质粒的消化，转化培养以及后续的酶切或测序鉴定，即可得到预期的突变质粒(参考图1)。累计操作时间不足2小时即可完成基因的定点突变。
参考图1，使用本试剂盒时需要先设计长度通常为30个碱基以上的互补的两个引物，在引物中含有预期的突变位点。然后以待突变的质粒为模板，用这两个引物进行PCR扩增反应。这样可以产生含有预期的突变位点的双链质粒，但这个双链质粒中有两个nick位点。待突变的质粒通常来源于大肠杆菌等细菌，在细菌中会被甲基化修饰，而在体外通过PCR扩增得到的质粒不会被甲基化。这样用甲基化酶Dpn I处理，可以消化掉待突变的质粒模板，而使通过PCR扩增出来的含有突变位点的质粒被选择性地保留下来。这样把Dpn I处理过的产物转化细菌后，质粒中有两个nick位点可以被大肠杆菌修复，得到的克隆就会含有预期的突变质粒了。
本试剂盒提供了DH5α甘油菌，可用于感受态细菌的制备。
本试剂盒共可以进行十次基因定点突变反应。
保存条件：
-20℃保存，一年有效。
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文献和实验为了研究某一基因的功能，我们通常不仅需要研究其野生型基因的功能，也需要进一步去挖掘它发挥作用时是哪一个结构域，甚至是哪一个氨基酸发挥了作用，而这里面就涉及到了如何设计定点突变引物的问题。今天为大家介绍一个在线网址—quickchange primer design，可以非常方便快捷为我们设计出合适的引物。网站链接：https://www.agilent.com/store/primerDesignProgram.jsp 该网站可以设计单点和多点突变引物以及删除或者插入一段 DNA 序列（插入
木瓜奶茶 请问基因定点突变能一次性突变两个基因吗？我准备把GAC突变成CAG。还是得一个一个地突变？ zhujoker 单个可以，一起也可以的 木瓜奶茶 谢谢啊！ ziyikeer 你是用试剂盒还是自己做啊？推荐一个试剂盒给你Easy Mutagenesis system。不过你要设计好引物，引物设计可以自己看说明书。 本文由丁香园论坛
本文先讲最简单的一个点的定点突变技术，其它较长片段的突变，删除，插入技术以后会慢慢奉上：在做实验之前，我们首先要搞清楚实验的目的和实验的原理。实验的目的应该比较明确吧：就是要把自己的基因上面的一个碱基换成另外一个碱基。一般情况下我们会有几种可能使我们需要这样去做：第一 我们吊出来的基因有点突变，相信这可能是大家经常会遇到的问题。基因好不容易吊出来，并装进了自己的载体，却发现有一两个碱基跟自己的预期序列或所有的公共数据库不匹配，然后暴昏。大家实验室里面还是用Taq酶为主吧，Pfu这样的高保真
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