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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
6个月
- 英文名:
Foot and mouth disease virus type O (FMDV-O) nucleic acid detection kit (RT-PCR fluorescent probe)
- 库存:
10
- 供应商:
沪震生物
- 规格:
次
【包装规格】24/50/96测试/盒
【类别】PCR-荧光试剂盒
【运输】低温、避光、快递免费送货上门。
【用途】生化实验,合成实验等试验。
口蹄疫病毒O型(FMDV-O)核酸检测试剂盒(RT-PCR荧光探针法)常见问题:
一.没有扩增产物
1.循环温度:变性温度、退火温度
2.引物设计
3.DNA聚合酶活性
4.抑制性成份(蛋白酶、核酸酶、其它抑制聚合 酶活性的成份)
5、DNA样品
二.非特异产物及电泳呈涂布状
1.Mg2 浓度
2.调整引物、模板、聚合酶的用量
3.适当减少循环数
4.适当提高退火温度,缩短退火或延伸时间
口蹄疫病毒O型(FMDV-O)核酸检测试剂盒(RT-PCR荧光探针法)的改进与完善:
Mullis最初使用的DNA聚合酶是大肠杆菌DNA聚合酶I的Klenow片段,其缺点是:
①Klenow酶不耐高温,90℃会变性失活,每次循环都要重新加,每加入一次酶只能完成一个扩增反应周期,给PCR技术操作程序添了不少困难。
②引物链延伸反应在37℃下进行,容易发生模板和引物之间的碱基错配,其PCR产物特异性较差,合成的DNA片段不均一。
2)1988年初,Keohanog改用T4 DNA聚合酶进行PCR,其扩增的DNA片段很均一,真实性也较高,只有所期望的一种DNA片段。但每循环一次,仍需加入新酶。
3)1988年Saiki 等从温泉中分离的一株水生嗜热杆菌(thermus aquaticus) 中提取到一种耐热DNA聚合酶。口蹄疫病毒O型(FMDV-O)核酸检测试剂盒(RT-PCR荧光探针法)此酶具有以下特点:
①耐高温,在70℃下反应2h后其残留活性大于原来的90%,在93℃下反应2h后其残留活性是原来的60%,在95℃下反应2h后其残留活性是原来的40%。
②在热变性时不会被钝化,不必在每次扩增反应后再加新酶。
③大大提高了扩增片段特异性和扩增效率,增加了扩增长度(2.0Kb)。由于提高了扩增的特异性和效率,因而其灵敏性也大大提高。为与大肠杆菌多聚酶I Klenow片段区别,将此酶命名为Taq DNA多聚酶(Taq DNA Polymerase)。此酶的发现使PCR广泛的被应用。
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文献和实验猪口蹄疫病毒(FMDV ) 酶联免疫 分析( ELISA ) 试剂 盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定猪血清,血浆及相关液体样本中 猪口蹄疫病毒(FMDV) 含量。 实验原理 : 本试剂盒应用双抗体夹心法测定 标本 中 猪口蹄疫病毒(FMDV ) 水平。用纯化的 猪口蹄疫病毒(FMDV ) 抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入 口蹄疫病毒(FMDV ) ,再与HRP 标记
,SVDV和VSV特异性扩增的3对引物,并通过对扩增体系和扩增条件的优化,建立了特异、敏感、快速的能同时检测FMDV,SVDV和VSV的多重RT-PCR方法。 1 材料与方法 1.1 病毒株 猪水疱病病毒RNA、标淮阳性血清、标淮阴性血清和参考样品由英国动物卫生研究所Pirbright实验室惠赠;VSV-NJ病毒株和VSV-IND病毒株从美国国家兽医服务实验室(NVSL)引进,由本实验室保存;FMDV O疫苗株从云南保山疫苗厂引进,由本实验室保存。 1.2 试剂
牛口蹄疫病毒( FMDV ) 酶联免疫分析(ELISA ) 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于检测牛血清,血浆中口蹄疫病毒(FMDV )水平,感染牛的血液学诊断。 实验原理: 本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫法( ELISA )测定标本中牛口蹄疫病毒( FMDV )。用纯化的牛口蹄疫病毒( FMDV ) 抗体 包被微孔板,制成固相抗体,可与样品中口蹄疫病毒( FMDV ) 相结合
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