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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
4℃四个周;如长期保存,2X Direct PCR Mix 须-20℃;勿反复冻融超过3次。
- 英文名:
FMDV-O
- 库存:
20
- 供应商:
上海泽叶生物科技有限公司
- 规格:
50T/100T
DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。
在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性)
发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。
2)口蹄疫病毒O亞型(FMDV-O)核酸检测试剂盒(RT-PCR法)普通PCR反应流程
3)反应原理
4)PCR循环
5)与荧光定量PCR技术相比较主要缺点。
口蹄疫病毒O亞型(FMDV-O)核酸检测试剂盒(RT-PCR法)荧光PCR简述
定义:在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号的变化,通过仪器软件实时检测PCR扩增反应中每一个循环扩增产物量的变化,通过Ct值和标准曲线实现对起始模板的定量分析。
荧光PCR检测分为两种方法:荧光探针法和荧光染料法。
荧光探针法检测原理:
荧光PCR如何实现实时监控的呢?
Ø PCR反应体系中加入荧光染料
Ø 所有的定量PCR仪器都有三个共同的组成部分(检测器、激发光源、热循环模块)
Ø 在扩增过程中,荧光信号随着PCR产物的增加而增强
Ø 每个循环结束后,定量PCR仪器通过光学系统记录荧光信号的增加
Ø PCR软件计算出数据,用于实验结果的分析
ARMS检测方法;1个SNP位点设计双管反应,含目的基因检测及内参检测双通道。
口蹄疫病毒O亞型(FMDV-O)核酸检测试剂盒(RT-PCR法)技术特点:
Ø 准确可靠,临床双盲对照试验>1000例,结果与金标准测序法比对,结果一致性大于99%。
Ø 高灵敏:可检测低至10ng的人基因组DNA。
Ø 快速:整个检测流程只需3小时。
Ø 简便:试剂盒提供预混好的试剂,使体系配置操作简便。
Ø 防污染
Ø 高特异性:双重特异性组成,保证检测结果的特异性和准确性引物与DNA互补链结合必需完全配对,才能延伸。探针特异性与所检测基因的PCR产物配对,在延伸中产生荧光。
伤寒杆菌(ST)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
气单胞菌(Asp)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
难辨梭状芽胞杆菌(Cd)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
人博卡病毒(HBoV)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
白喉杆菌(CD)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
猩红热链球菌(ST)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
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文献和实验,SVDV和VSV特异性扩增的3对引物,并通过对扩增体系和扩增条件的优化,建立了特异、敏感、快速的能同时检测FMDV,SVDV和VSV的多重RT-PCR方法。 1 材料与方法 1.1 病毒株 猪水疱病病毒RNA、标淮阳性血清、标淮阴性血清和参考样品由英国动物卫生研究所Pirbright实验室惠赠;VSV-NJ病毒株和VSV-IND病毒株从美国国家兽医服务实验室(NVSL)引进,由本实验室保存;FMDV O疫苗株从云南保山疫苗厂引进,由本实验室保存。 1.2 试剂
疯牛病的牛只经过焚化处理,灰烬仍然有疯牛病毒,把灰烬倒在堆田区,病毒就可能会因此而散播。 目前,对于这种毒蛋白究竟通过何种方式在牲畜中传播,又是通过何种途径传染给人类,研究的还不清楚,迄今为止这种病毒还没有确切的命名。 口蹄疫病毒(Foot-and-mouth Disease Virus,FMDV) (一) 口蹄疫 口蹄疫是由口蹄疫病毒感染引起的偶蹄动物共患的急性、热性、接触性传染病,最易感染的动物是黄牛、水牛、猪
、小 RNA、原核 mRNA)的 RNA、降解 RNA(如来自 FFPE 组织的 RNA)和具有已知二级结构的 RNA(如病毒基因组)的反转录。 虽然随机引物有助于改善 cDNA 合成,但它们不适合用于长 RNA 的全长反转录。增加随机六聚体引物的浓度可提高 cDNA产量,但同时也会增加相同模板上与多个位点的结合,从而导致 cDNA 片段较短(图 4)。 此外,随机引物可能不适用于某些 RT-PCR 应用。例如,高估 mRNA 拷贝数就是一个需要考虑的问题[5]。两步法RT-PCR经常使用
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