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- 2025年11月03日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
6个月
- 英文名：
PCR (SH) nucleic acid assay kit for swine dysentery
- 库存：
10
- 供应商：
沪震生物
- 规格：
次
【包装规格】24/50/96测试/盒
【类别】PCR-荧光试剂盒
【运输】低温、避光、快递免费送货上门。
【用途】生化实验，合成实验等试验。
猪痢疾蛇形螺旋体(SH)核酸检测试剂盒(PCR法)常见问题：
一.没有扩增产物
1.循环温度：变性温度、退火温度
2.引物设计
3.DNA聚合酶活性
4.抑制性成份(蛋白酶、核酸酶、其它抑制聚合 酶活性的成份)
5、DNA样品
二.非特异产物及电泳呈涂布状
1.Mg2 浓度
2.调整引物、模板、聚合酶的用量
3.适当减少循环数
4.适当提高退火温度，缩短退火或延伸时间
猪痢疾蛇形螺旋体(SH)核酸检测试剂盒(PCR法)的改进与完善：
Mullis最初使用的DNA聚合酶是大肠杆菌DNA聚合酶I的Klenow片段，其缺点是：
①Klenow酶不耐高温，90℃会变性失活，每次循环都要重新加，每加入一次酶只能完成一个扩增反应周期，给PCR技术操作程序添了不少困难。
②引物链延伸反应在37℃下进行，容易发生模板和引物之间的碱基错配，其PCR产物特异性较差，合成的DNA片段不均一。
2）1988年初，Keohanog改用T4 DNA聚合酶进行PCR，其扩增的DNA片段很均一，真实性也较高，只有所期望的一种DNA片段。但每循环一次，仍需加入新酶。
3）1988年Saiki 等从温泉中分离的一株水生嗜热杆菌(thermus aquaticus) 中提取到一种耐热DNA聚合酶。猪痢疾蛇形螺旋体(SH)核酸检测试剂盒(PCR法)此酶具有以下特点：
①耐高温，在70℃下反应2h后其残留活性大于原来的90%，在93℃下反应2h后其残留活性是原来的60%，在95℃下反应2h后其残留活性是原来的40%。
②在热变性时不会被钝化，不必在每次扩增反应后再加新酶。
③大大提高了扩增片段特异性和扩增效率，增加了扩增长度(2.0Kb)。由于提高了扩增的特异性和效率，因而其灵敏性也大大提高。为与大肠杆菌多聚酶I Klenow片段区别，将此酶命名为Taq DNA多聚酶(Taq DNA Polymerase)。此酶的发现使PCR广泛的被应用。
真细菌种属鉴定PCR Mix 2 50T 大鼠凝血因子Ⅹ(FⅩ)ELISA Kit
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文献和实验PCR法是20世纪80年代中期建立起来的一种体外DNA扩增技术，其基本原理是酶促DNA合成反应，即在DNA模板、引物和脱氧核糖核酸存在下，经DNA聚合酶的作用，使DNA 链扩增延伸。该方法具有灵敏度高、特异性强、快速的特点，但其对实验环境的要求严格，实验成本较高，有时还有假阳性的现象出现。 1、仪器设备 超净工作台、PCR仪、电泳仪、凝胶成像分析系统、台式离心机、旋涡混悬器等。 2、实验试剂 选用美国Stratagene公司生产的支原体检测试剂盒（内有引物、阳性
aptamers The IgE specific DNA aptamer sequence (5’-GGG GCA CGT TTA TCC GTC CCT CCT AGT GGC GTG CCC C-3’) and the negative control DNA (5’-GGG GCA CGT TTA TTT TTT TTT TTT TGT GGC GTG CCC C-3’) were ordered with TTT TTT T-(CH2)6–SH spacer
生产成本。珠介质分析方法的生产过程中也比较简单，它是将核酸是固定到通过尺寸筛选的大珠介质上。 图5 SMCC（含一个伯胺R-NH2）与巯基（R’-SH）之间的双功能连接反应 尽管期望将喷雾技术及干燥染色方法应用到核酸膜介质检测方法中，但是目前对于生产，特别是在分析产品的生产阶段，还没有找到一种成熟的工艺技术可以对生产过程进行控制。 紫外交联试剂加入到一标准连续的生产过程中，通过传统的碱基定向连接方法或者使用一种特殊化学试剂使得核酸的光连接变的相对简单。光源将会随时间衰减，因此，为保证生产设备的全
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