ADP/ATP发光法细胞活力检测试剂盒

ADP/ATP发光法细胞活力检测试剂盒

英文名：ADP/ATP Luminescent Cell Viability Assay Kit
规格：200次
产品简介:
ATP生物发光技术的原理是荧光素酶(Luciferase)以荧光素(Luciferin)、三磷酸腺苷(ATP)和O2为底物,在Mg2＋存在时,能将化学能转化为光能。ATP既是荧光素酶催化发光的必需底物,又是所有生物生命活动的能量来源。在荧光素酶催化的发光反应中,ATP在一定的浓度范围内,其浓度与发光强度呈线性关系。
研究表明,各生长期的细菌均有较恒定水平的ATP含量,因此,提取细菌的ATP,利用生物发光法测出ATP含量后,即可推算出样品中的含菌量,整个过程仅为十几分钟。由于生物发光法无需培养微生物过程,操作简便、灵敏度高,在短时间内即可得到检测结果,具有其他微生物检测方法无可比拟的优势,是目前检测微生物最快的方法之一。
本试剂盒采用生物发光(bioluminescent)法,利用Firefly luciferase(萤火虫荧光素酶)催化底物Luciferin(荧光素)的转化,高效利用ATP的能量,发射出光子。发光信号与存在的ATP量呈正比,而ATP与存在于培养基中的细胞数目直接呈正比。ATP的检测灵敏度达到10-13 ,故具有极高的敏感性。本试剂盒首先利用荧光素酶反应体系,测定样品中ATP的发光值,然后用ATP转换酶将ADP转化成ATP,再次利用同样的发光体系,测定样品中ADP转化所得的发光值。获得的结果可提供样品中ADP和ATP的相对含量及其变化,从而了解酶促反应的进程或细胞状态的改变。该产品特点如下:
1.高度敏感:灵敏度达到10-13
2.快速简便:适合高通量筛选
使用及效果:
收取细胞提取ATP,在孔/皿中加入足量1x细胞裂解液裂解。裂解细胞含量较多时,可将样品用双蒸水稀释,以保证在测定ATP 的线性范围内。按20/1 比例用ATP反应缓冲液稀释荧光素,再加入1/10 体积的荧光素酶,配制成发光反应液。取待测样品5μL加入测量管底部,取发光反应液 50μL加入管底部,轻轻敲击管壁3～5次混匀,放入仪器中立即测定,记录发光值为荧光素酶催化的发光单位(RLU)。加入ATP转化酶,测定RLU。
运输及保存:
低温保存和运输, -20℃或-80℃避光保存,有效期6个月。