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- KALANG
- 中国大陆
- KL-D6156
- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
2～8℃
- 保质期：
6个月
- 英文名：
Renilla Luciferase Assay Kit
- 库存：
大量
- 供应商：
康朗生物
- 规格：
100次
海肾荧光素酶活性检测试剂盒
规格：100次英文名：Renilla Luciferase Assay Kit
产品简介:
报告基因检测是真核基因表达调控研究的常用方法。由于检测光量子的方法非常敏感,采用生物发光(bioluminescent)法,是报告基因检测最常用的有效手段。
荧光素酶(luciferase)催化底物荧光素(luciferin)的转化,发射出光子。海肾荧光素酶(Renilla luciferase)催化的发光反应,具有很好的浓度线性范围(7～8个数量级),酶的检测灵敏度达到10-18 mol。
本试剂盒采用通用裂解缓冲液(Universal Lysis Buffer,ULB),能与其他类型的报告基因检测和蛋白含量检测兼容；可与萤火虫荧光素酶报告基因检测试剂盒共同使用,进行一体化的双荧光素酶检测。该产品特点如下:
1.高度灵敏:可检测10-18～10-20 mol海肾荧光素酶
2.线性范围宽:线性范围达到7～8个数量级
3.快速简便:特别适合于高通量筛选
使用及效果:
收取转染细胞,加1x通用裂解液裂解。按50/1 比例用Assay Buffer R稀释Substrate R,配制所需体积的发光检测液。样品中加入发光检测液,测定酶催化的发光单位RLU。(不同容器细胞所需1xULB的体积详见产品使用手册)
运输及保存:
低温保存和运输, -20℃或-80℃避光保存,有效期6个月。
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文献和实验ddm_anny 各位大虾们，我最近在做一个基因启动子的活性检测，用的是promega 公司的试剂盒，构建了几个5’逐渐缺失的报告基因，做转染的时候用的是跨物种的T98G cell line, 选择peGFP来估计转染效率，同时用PGL-3-Control和PGL-3-Basic来估计整个测量系统，结果显示转染效率还是可以，主要是PGL-3-Control组的荧光素酶活性值达到25万，同时PGL-3-Basic组的读数还不到100，也就是说体系是没有问题的，关键
生物发光是一种依赖于酶和底物的相互作用来产生光的化学过程。所需的酶被称为荧光素酶，底物因荧光素酶的类型而不同（如荧光素）。 常用荧光素酶信息表： 其中最有代表性的是来自萤火虫体内（Firefly）和海肾（Renilla）体内的两类萤光素酶，分别命名为萤火虫荧光素酶（FLuc）和海肾荧光素酶（RLuc），同时近年来研究得较多的是来源于高斯氏菌的高斯荧光素酶（GLuc）。 萤火虫荧光素酶（FLuc）作为最通用和最常见的报告基因，该蛋白质不需要翻译后修饰即可获得酶活性，可用于原核和真核细胞。FLuc
反应需同时有 ATP、Mg2+、O2 的参与，发光波长为560nm，发光颜色呈黄绿色（图 1）。FLuc 通常作为报告基因，反映目的基因的表达情况。其转录翻译后无需修饰，即可具有酶活性。 图 1. FLuc 与荧光素的反应式 海肾荧光素酶（RLuc）：RLuc 催化腔肠素发光需要 O2 的参与，发光波长为 465nm，发光颜色为蓝色（图 2）。在双荧光素酶报告系统中，RLuc 通常作为内参报告基因。RLuc 也无需翻译后修饰，即可形成酶活性。 图 2. RLuc 与腔肠素的反应式 荧光蛋白和荧光素酶的区别 荧
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