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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
冷藏
- 保质期:
长期
- 英文名:
5×DualColor Protein loading buffer
- 库存:
大量
- 供应商:
康朗生物
- 规格:
5×1ml
5×DualColor蛋白上样液 双染料(还原)
规格:5×1ml英文名:5×DualColor Protein loading buffer
保存条件:-20℃保存。
产品简介
5×双色蛋白上样缓冲液(还原)是5倍浓缩的SDS-PAGE凝胶电泳上样缓冲液,应用
于还原型SDS-PAGE的蛋白样品制备和上样。该缓冲液中含有两种示踪染料:溴酚蓝
和吡啰红Y,可以指示SDS-PAGE电泳过程以及Weastern blot的转膜效率。该缓冲液
已经加入DTT,可使蛋白质分子的链内二硫键和链间二硫键断裂,经考马斯亮蓝染色
以后在电泳凝胶上显现清晰蛋白条带。
操作步骤
融化-混合-变性-上样
1.将5×双色蛋白上样缓冲液37℃数分钟解冻后轻轻摇匀,以确保溶液混合均匀。
2. 将缓冲液与蛋白样品按照1:4的比例混匀。
3.将蛋白样品置于95℃中加热5分钟。
4.待蛋白样品充分变性后冷却至室温,快甩离心收集到管底,直接加入SDS-PAGE凝
胶加样孔内电泳。
本产品仅供科研使用,请勿用于临床诊断及其他用途
注意事项
1.由于含有DTT,该缓冲液不适合于Native SDS-PAGE电泳。非变性电泳请选择
4×Native-PAGE protein loading buffer(Cat No:PL070)
2. 一般说来,电泳中吡啰红Y泳动速度快于溴酚蓝,但在高浓度SDS-PAGE胶中(高于
15%分离胶),吡啰红Y泳动速度慢于溴酚蓝。
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文献和实验于冰箱中。 10、分别在两张载片上各滴一滴加热和未加热的叶绿体悬浮液,并用盖片盖起来,在油镜下观察这两种叶绿体的形态。 (二)叶绿体对染料还原作用。 试管号 染料(2×10-4 M) STN缓冲液 DCMU(1×10-4 M
实验40 离体叶绿体对染料的还原作用(希尔反应) 原理 离体的完整叶绿体,在合适的氧化剂存在下,例如染料二氯靛酚(DCPIP),当照光时,可以使水光解释放氧气,同时使染料还原,结果染料从原来的蓝紫色变为粉红色至无色。此反应为希尔所发现,故常称为希尔反应。可用分光光度计测定反应前后染料吸光度A的变化,变化在4─5分钟内呈线性关系。 仪器药品
。 (2) 按照常规方法进行电泳即可。 u 注:此方法染色可以准确确定片段分子量,用量相对较少。1mL染料大约可以做300块100mL的胶。 2.点染法 (见图3) (1) 该方法适于琼脂糖凝胶电泳和PAGE凝胶电泳。 (2) 工作液的配制:用电泳缓冲液将10000×的SUPER Green Ⅰ稀释100倍,即为SUPER Green Ⅰ工作液。SUPER Green Ⅰ工作液可以置2~8℃保存一个月以上。 (3) 制胶:按常规方法制胶,不含任何染料
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