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- 详细信息
- 文献和实验
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20
- 供应商:
泽叶生物
- 规格:
瓶
规格:100ml,200ml,500ml(本产品规格可根据客户需求)
单位:瓶
保存方式及年限:五年
运输方式:快递
血清就是给细胞提供营养的,例如你培养细胞时细胞培养基中也需要加血清一样。
如果你培养的细胞是不含血清培养基培养,在选用冻存液时也一定要用无血清细胞冻存液了,这个就需要购买了。
另外自己配冻存液,可以是血清:DMSO=9:1,也可以是培养基:血清:DMSO=8:1:1
产品使用注意事项(仅供参考):
1.血清解冻最好采用逐步解冻法(-20℃→2—8℃→25℃或37℃),解冻过程中必须随时轻摇,使血清受热温度均匀。
2.血清凝絮物,血清解冻后会出现少量片状或絮状物析出,这主要是由于血清内不稳定蛋白变性、纤维蛋白析出形成沉淀物,实验证明沉淀物不会影响血清本身质量。
3.热灭活本产品除注明外均未灭活。如果必须灭活,请严格按照56℃30分钟(水浴)处理已解冻血清。
4.常温状态下短期融化并不会影响血清质量。
5.产品有效期,检定合格之日起有效期5年。
2%豚鼠红细胞是细胞培养中最重要的元素之一。在实验室操作中要注意及处理方法:
1. 血清保存: 建议血清应保存在-5℃至-2O℃。然而,若存放于4℃时,请勿超过一个月。若您一次无法用完一瓶,建议您无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。
2. 解冻血清的方法: 建议您将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。
3. 血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,该如何处理?
血清中沉淀物的出现有许多种原因,但最普遍的原因是由于血清中脂蛋白的变性所造成,而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解冻后,也会存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但这些絮状沉淀物,并不影响血清本身的质量。
若您欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。我们不建议您以过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞您的过滤膜。
4. 为什么要热灭活血清?
加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件,刺激平滑肌收缩,细胞和血小板释放组胺,激活淋巴细胞和巨噬细胞。在免疫学研究,培养ES细胞,昆虫细胞和平滑肌细胞时,推荐使用热灭活血清。
5. 2%豚鼠红细胞有必要做热灭活吗?
实验显示,经过正确处理的热灭活血清,对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清,沉淀物的形成会显著的增多,这些沉淀物在倒置显微镜下观察,像是“小黑点”,常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。
因此我们建议您,若非必须,您可以不需要做热处理这一步。如此一来,不但节省您宝贵的时间,更确保血清的质量!
6. 为什么储存在冰箱中的胎牛血清会出现沉淀?
胎牛血清没有预老化,储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。这应该不会影响血清的质量。推荐在-20℃储存胎牛血清,避免反复冻融。
7. 如何避免沉淀物的产生?
解冻2%豚鼠红细胞时,请按照所建议的逐步解冻法(-20℃至4℃至室温),若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃),实验显示非常容易产生沉淀物。
解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。
请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,而影响血清的质量。
血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。
若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。
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文献和实验新鲜脱纤维羊血或Alsever液保存的羊血(4℃可保存3周) 用生理盐水洗2次,第三次用缓冲盐水,2500r/min离心lOmin,取压积红细胞用缓冲盐水配成2%悬液。为使SRBC浓度标准化,可将2%悬液用缓冲盐水稀释25倍,于分光光度计(542nm)测定其透光率(以缓冲盐水校正透光率至100%)。每次实验所用SRBC浓度(透光率)必须一致,否则应予调整;(4)致敏SRBC 2%SRBC悬液加等量1:1000溶血素,混匀,37℃水浴10rain;(5)豚鼠血清 取3只成年健康豚鼠血清混合分装
悬液的体积(V): V体积(ml)=15×光密度0.49 V-15=还需加入6%红细胞悬液中的缓冲液毫升数。 6) 于上述1.5ml 6%红细胞悬液中加入1.5ml 1∶150稀释的溶血素,充分混匀后,37℃水浴15~20min,此种3%致敏绵羊红细胞,可于4℃保存过夜,使用前,再经37℃水浴保温。 2. 豚鼠补体的滴定 1) 于冷冻干燥的豚鼠补体中,加蒸馏水至原来体积,室温放置5min,轻轻混匀,避免产生
认为,醇类固定剂在保持组织形态方面不如甲醛类固定剂。醇类的渗透性不如甲醛,主要用于固定冷冻组织切片和细胞。因此,醇类固定更适用于膜表面抗原。醇类固定后不建议进行抗原修复,因为抗原修复通常被认为过于剧烈,可能会破坏组织切片或细胞的完整性。 丙酮 丙酮是一种强脱水剂,可导致组织蛋白不可逆沉淀。它通常用于未经固定、速冻的组织切片,之后再用酒精或甲醛进行固定。 组织固定 对于研究小鼠、大鼠和豚鼠等小型动物的完整组织而言,全动物灌注固定通常是保存抗原的最佳方法。该方法是将动物的体循环血液替换为固定液。然而,全动物
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