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赫澎(上海)生物
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文献和实验一、目的: 了解并掌握地衣酚法测定RNA含量的基本原理和具体方法。 二、原理: RNA含量测定,除可用紫外吸收法及定磷法外,常用地衣酚法测定。其反应原理是:当RNA与浓盐酸共热时,即发生降解,形成的核糖继而转变成糠醛,后者与3,5-二羟基甲苯(地衣酚orcinol)反应,在Fe3+或Cu2+催化下,生成鲜绿色复合物。反应产物在670nm处有最大吸收。RNA浓度在20―250μg・ml-1范围内,光吸收与RNA浓度成正比。地衣酚法特异性差,凡戊糖均有此
碱水解成核苷酸,在实验室中常利用这个反应水解RNA样品或除去其他样品中的RNA杂质。 D-核糖与浓盐酸和苔黑酚(甲基间苯二酚)共热产生绿色,可利用这个颜色反应定量测定RNA。
相关专题 一、实验目的 ①学习和掌握从植物 组织中分离核酸的原理和操作方法。 ②学习和掌握测定核酸含量的定糖法(苔黑酚法和二苯胺法)的原理及操作方法。 二、实验原理 核酸是生物体内的主要化学成分,核酸在生物体内主要以核蛋白的形式存在。核酸分为脱氧核糖核酸 (DNA)和核糖核酸(RNA)。DNA主要存在与在细胞核 中,RNA主要存在于细胞质中。 用冰冷的稀三氯乙酸或高氯酸溶液在低温下抽提菜花匀浆,以除去酸溶性小分子 物质。再由有机溶剂如乙醇、乙醚
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