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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
冷藏
- 保质期:
长期
- 英文名:
Immunol Staining Wash Buffer
- 库存:
大量
- 供应商:
康朗生物
- 规格:
250ml
免疫染色洗涤液
规格:250ml英文名:Immunol Staining Wash Buffer
免疫染色洗涤液可以用于免疫染色时一抗或二抗孵育后的洗涤。适当的洗涤可以降低背景,增强信噪比。
本免疫染色洗涤液中含有适量Triton X-100,可以通透细胞膜。经本免疫染色洗涤液处理的细胞样品可以检测细胞内的目的蛋白,包括细胞浆内和细胞核内的目的蛋白。
照每组样品洗涤需要5-10毫升免疫染色洗涤液计算,一个包装的免疫染色洗涤液可以洗涤25-50次。
保存条件:
4℃保存,一年有效。
注意事项:
本免疫染色洗涤液经过滤除菌处理,使用过程中应尽量避免细菌污染。一旦启用后建议在2周内用完。
使用说明:
在一抗或二抗孵育结束后,加入少量免疫染色洗涤液,使之能盖住样品,在摇床上缓慢摇动洗涤5分钟
后,吸尽洗涤液,再加入新的洗涤液洗涤。共洗涤3次,每次5分钟。然后进行后续的操作。
如果摇动容易导致样品脱落,可以在不摇动的情况下浸泡洗涤。在浸泡洗涤的情况下,需适当延长洗涤时间至8-10分钟/次,增加洗涤次数至4-5次。
如果按照上述洗涤条件免疫染色结果背景仍然较高,可以适当延长洗涤时间,并增加洗涤次数。通常,延长洗涤时间或增加洗涤次数不会对免疫染色结果产生负面影响。
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文献和实验转印到纸上的蛋白质抗原,可与其专一性抗体结合,再以二次抗体-酶结合体(2nd Ab-HRP) 或Protein A-HRP 呈色;可在一群转印色带中,专一性地挑出目标蛋白质,是最有用的检定工具 (Burnett,1981)。 药品试剂: 抗体溶液:可用传统抗血清或单株抗体,其最适使用浓度,随抗体效价不同而异,以下为一般适用范围的参考,均以明胶-NET 稀释的。 a. 传统抗血清: 1:100 到1:1,000 b. IgG (冷冻干燥品): 10~50 μg/mL c. 单株抗体
试剂和材料:1. 一抗:(1) ABCG2-----------------小鼠单克隆BXP-21---------1:100(2) 连接蛋白-43-----------兔多克隆CX43-------------1:100(3) 细胞角蛋白3(K3)-----小鼠单克隆AE5----------- 1:500(4) 细胞角蛋白12(K12)---兔多克隆J7-------------- 1:2002. 二抗;(1) 抗小鼠IgG-------------Alexa-488----
ß-gal Staining: Reagents: 0.1M Phosphate Buffer (pH 7.3):
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