囊式滤器，0.2/0.2µm，500cm²（经过验证的细胞培

膜蛋白纯化攻略分享

电镜技术的发展，会有更多的膜蛋白结构得到解析，助力后续的功能研究和药物发现。 有了冷冻电镜这把利器之后，真正制约膜蛋白研究的其实是样品的制备。   常规的膜蛋白制备流程如下：  图 1. 常规的膜蛋白制备流程图   特点是： 蛋白含量低 收率低 活性易降低 纯化过程需要优化   去垢剂 天然表达的膜蛋白含量极低，很难纯化。就算是重组表达体系，生产出的膜蛋白通常具有细胞毒性，因此表达量也远低于常规重组蛋白。在整个纯化过程中都需要选择合适的去垢剂才能使膜蛋白本身保持空间构象和活性。 去垢剂可分为三种： 表

腕间膜 interbrachial membrane

　　 亦称为伞膜（ web）。是头足类在腕与腕之间的膜状构造。在十腕类（乌贼）是不明显的，但在八腕类（章鱼），则以宽而薄的膜扩展着。是前足或上足的延伸。  

重组腺病毒构建，扩增及纯化基本技术操作

  将菌液转移至预冷的离心管中，4℃下以2500r/min离心15 min，弃培养液，回收细胞。 ²       以10ml预冷的10%甘油洗涤沉淀，低温离心，共两次。 ²       加约1ml（适量）预冷的10%甘油重悬沉淀，稀释悬液100倍，测量OD600 ， 至稀释浓度为2-3×1010 个细胞/ ml (1.0 OD600 约2.5×1010 个细胞/ml)。分装，-80℃或液氮保存待用。 2  病毒骨架质粒转化大肠杆菌，扩增，纯化。 3  将1-5µl