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上海研谨生物科技有限公司
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文献和实验/L TES-KOH,pH 7.2,以及 0.1% ( m/V ) BSA 作为一种广泛用于各种植物组织线粒体提取的清洗缓冲液,即可用来悬浮和清洗线粒体,同时也用来配制 Percoll 梯度溶液。 2.4 Percoll 梯度溶液 用 0.3 mol/L 蔗糖或 0.3 mol/L 添加 10 mmol/L TES 的甘露醇,pH 7.2,0.1% (m/V) BSA 在使用当天配制 Percoll 梯度溶液(见注释 1、2、3) 。如果要准备连续梯度,则必须使用密度梯度制备仪(图
)处理 48 小时,抑制非神经元细胞的生长。然后,体外培养 6-7 天后,完全更换培养基,将神经元细胞用于下述实验。为对谷氨酸处理神经元细胞CI 值的改变进行监测,必须于培养第0天,于细胞中添加 1 µM CAF。 细胞增殖检测 根据细胞增殖试剂盒I (MTT)(罗氏)的说明书,通过比色MTT(3-[4,5-二甲基砷-2-yl] -2,5-溴化噻唑蓝四氮唑) 检测,对神经元细胞活性进行检测。通过自动FLUOstar Optima 读取仪(德国 Offenburg ,BMG
%(casein),4-16%(casein)30-200 kDa2个月90分钟利用casein 和gelatin作为底物,确定特别活性蛋白酶。表2 获得最佳结果的推荐上样量聚丙烯酰胺凝胶1孔IPG孔2D孔5孔9孔10孔12孔15孔17孔最大上样量/孔1.0 mm厚度700 µl7 cm IPG条400 µl60 µl28 µl25 µl20 µl15 µl15 µl1.5 mm厚度n/an/a600 µln/an/a37 µln/a25 µln/a推荐获得最佳分辨率的最大上样量*每条蛋白带,考马斯亮兰染色
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