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上海研谨生物科技有限公司
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文献和实验Tris(PH=6.8) 10% SDS 40 µl 10% ammonium persulfate 40 µl TEMED 7 µl C. Preparation of gel 1. Assemble the glass plates and spacers (0.75 mm thick). 2. Pour the running gel to about 1 cm below the wells of the comb (~3.2 ml). 3. Seal with 1 ml
) 40 µM round A primer (see recipe for PCR primers) 10 ng/µl sheared genomic DNA generated from the same cells used in the ChIP procedure
的替代方法都应先做小规模的试验,并且用于整个点片和杂交过程以确保合适。下面介绍已被成功使用的一种候选方法。 聚丙烯酰胺葡聚糖纯化法:这种方法的原理是用一个简单的凝胶过滤树脂,保留盐离子和其它一些小的分子,而排出PCR产物。因为DNA在水中洗脱而被排出,这样就不需要沉淀过程了。同上所述,操作时必须十分谨慎,以防树脂污染点片溶液。要纯化100µlPCR反应物,准备聚丙烯酰胺葡聚糖S400树脂(Sigma S400 HR)并以2:1的比例用ddH2O稀释。以100µl每等份分装到96孔滤板中
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