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文献和实验。 TBS-380微型荧光计的4-MU测定法 将4-MU系列稀释液的重复荧光检测结果进行平均、绘图。为了更高的精确度,用两个不同的校准值500nM和50nM产生了两个重叠曲线。两个曲线都显示有R2值,表明荧光值和4-MU浓度存在线性关系。TBS-380微型荧光计对4-MU的检测底线(MDL)是0.1nM,具有99.5%的可信度(Ziebold, 1967)。 3 所需器材 带有紫外激发模块
荧光是自然界常见的一种发光现象,通过激发光进行激发,进而发射出比激发光波长长的发射光。荧光成像的理论基础是荧光物质被激发后所发射的荧光信号的强度在一定的范围内与荧光物质的量成线性关系。荧光成像系统包括荧光信号激发系统(激发光源、光路传输组件)、荧光信号收集组件、信号检测以及放大系统(CCD、PMT)。 实验原理: 荧光成像的标记方法有两种。一种是荧光蛋白的标记方法,与生物发光类似,将荧光蛋白基因作为报告基因,连接于启动子下游,稳定整合到细胞染色体内。另一种则是荧光染料标记好细胞或药物
传导、肿瘤、细胞周期调控、细胞结构、细胞凋亡和神经生物学等广泛的领域。通过这张芯片,我们在一次实验中就能够比较几百种蛋白的表达变化。Ab Microarray 380上抗体是经过精心挑选的,这些抗体不仅可以识别人源的蛋白,对小鼠和大鼠样品同样有效。另外,每个抗体的结合亲和力都经过了实验测定,从多种抗体来源的克隆中筛选出反应特异性好,交叉反应程度小,信号明显的抗体,并且还要保证信号与抗原浓度有着良好的线性关系。优化的抗体探针才可以保证反应的特异和灵敏(可检测20pg/ml的抗原浓度)。芯片的检测是用荧
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