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- DSMZ细胞
- 美国/德国/日本
- ACC--1630
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-80℃冻存
- 保质期：
二年
- 英文名：
OCM-1、OCM1
- 库存：
20
- 供应商：
上海泽叶生物科技有限公司
- 规格：
1x10^6 cells
细胞英文(简称）:OCM-1、OCM1
细胞来源: ATCC DSMZ JCM ECACC
代次:P3
规格:T25
细胞数:1x10^6 cells
组织来源:眼
细胞形态:贴壁
细胞活力:95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）
细胞检测细胞不含有:HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
培养条件:DMEM(高糖) +10% FBS；37℃，5% CO2
传代方法建议:1:2-1:3 两天换液一次
冻存条件:90%FBS+10%DMSO
传代细胞培养操作步骤
1、 37度水浴加热所有试剂。
2、 吸取培养培养皿内旧培养液，放置一个干净离心管内。（为稍后终止消化作准备。）
3、 用PBS清洗培养皿，弃去。
4、 向瓶内加入消化液（胰蛋白酶液）。以能覆盖培养瓶底为宜。（一般一个大皿1ml）
5、 2-5分钟后，轻轻震荡培养皿。使OCM-1、OCM1；人眼脉络黑色素瘤细胞从瓶壁脱离形成细胞悬液。显微镜下观察若细胞由贴壁变为悬浮就加入血清（即原培养液）终止消化。
6、 收集细胞悬液，880转/分、5分钟离心，弃去上清液。
7、 加培养液至1ml，混匀后取10ul计数细胞。
8、 根据实验要求取适量细胞留种或接种于新的培养皿或96孔板、24孔板中，再加入相应体积的培养液。（90mm大皿是9ml，中皿好像是4mm，6孔板和小皿是2ml，96孔板是100ul）。
9、 接种好的培养皿顺时针和逆时针各转三圈，使细胞排列均匀。
10、 放入暖箱中继续培养。
细胞计数步骤：
1、将计数板及盖片擦拭干净，并将盖片盖在计数板上.
2、将细胞悬液吸出少许，用台盼兰溶液对被稀释后滴加在盖片边缘，使悬液充满盖片和计数板之间。(台盼兰用于标记死亡细胞。)
3、镜下观察，计算计数板八大格细胞总数，压线细胞只计左侧和上方的。然后按下式计算：
细胞数/ml＝8大格细胞总数/ 8×2×10000
细胞冻存与复苏：
OCM-1、OCM1；人眼脉络黑色素瘤细胞冻存和复苏的原则：慢冻快融
当细胞冷到零度以下，可以产生以下变化：细胞器脱水，细胞中可溶性物质浓度升高，并在细胞内形成冰晶。
如果缓慢冷冻，可使细胞逐步脱水，细胞内不致产生大的冰晶；相反，结晶很大，大结晶会造成细胞膜、细胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重结晶。
1．冻存细胞
（1）选对数增生期细胞，在冻存前1d换液。
（2）按常规方法把培养细胞制备成悬液，计数，使细胞密度达5×106／m1左右密度，离心，去上清。
（3）加入配制好的冻存液（培养液6.8ml，小牛血清2ml，DMSO 1ml，5.6%NaHCO3 0.1ml），按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞成再悬液。冻存细胞时培养液中加入保护剂10％二甲基亚砜(DMSO) 或甘油，它是一种渗透性保护剂，可迅速透入细胞，提高胞膜对水的通透性，降低冰点，延缓冻结过程，能使细胞内水分在冻结前透出细胞外，在胞外形成冰晶，减少胞内冰晶，从而减少冰晶对细胞的损伤
（4）分装于无菌冻存管中，每管加1.5m1悬液。
（5）旋好冻存管并仔细检查，一定要盖紧，作好标记。
（6）冻存：在特殊的仪器或简易的液氮容器中，按-1℃／min的速度,在30～40 min时间内,下降到液氮表面，再停30 min后，直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度，过快能影响细胞内水分透出，太慢则促进冰晶形成。
标准程序：
当温度在-25℃以上时， 1～2℃/min
当温度达-25℃以下时， 5～10℃/min
当温度达-100℃时，可迅速放入液氮中
简易程序：
将冷冻管（管口要朝上）放入纱布袋内，纱布袋系以线绳，通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口，按每分钟温度下降1～2℃的速度，在40分钟内降至液氮表面，停30分钟后，直接投人液氮中。
操作时应戴防护眼镜和手套，以免液氮冻伤。
2. 复苏细胞
（1）从罐中取出冻存管。
（2）迅速放入37℃水浴，不时摇动，使其急速融化，30～60s内完成。
（3）冻存管用70％酒精擦拭消毒后,打开盖子,用吸管将细胞悬液注入离心管中,再滴加10 m1培养液。
（4）OCM-1、OCM1；人眼脉络黑色素瘤细胞低速离心(880r／min) 5 min，去上清后再用培养液洗一次。
（5）用培养液适当稀释后，装入培养瓶37℃培养，次日更换一次培养液后，继续培养。以后仍按常规进行培养。
冻存细胞数量要充分，密度应达到107／m1，在融后稀释20倍后，仍能保持5×105／m1数量。
| ECACC细胞库 | 88102701 | C-4 II | 90111910 | FL (HeLa derivative) | 94022427 | TGP 49 | 5071502 | MDCK-SIAT1 | 85011420 | P3X63Ag8.653 |
| ECACC细胞库 | 88102702 | NCTC clone 929 | 90112710 | CCD 25Lu | 94022429 | TGP 52 | 4100601 | RaBE | 85011422 | BSC1 |
| ECACC细胞库 | 88111401 | TM4 | 90112711 | 4/4 RM-4 | 94022430 | TGP 54 | 4100602 | RaBE (Slow Growth) | 85011423 | BHK TK- |
| ECACC细胞库 | 88111403 | NCTC clone 1469 | 90112712 | Fc2Lu | 94022431 | DSL6A/C1 | 96020936 | UM-UC-3 | 85011425 | L929 |
| ECACC细胞库 | 88112301 | N18 | 90112713 | SW 1463 | 94030304 | SH-SY5Y | 5070501 | BICR 6 | 85011426 | A9 |
| ECACC细胞库 | 88112302 | NG108-15 | 90112714 | PC-3 | 94041901 | Hs 27 | 5090501 | MRC-5 pd30 | 85011427 | P3/NS1/1-Ag4.1 |
| ECACC细胞库 | 88112303 | N1E-115 | 90112715 | G-402 | 94042252 | EoL-1 cell | 96020925 | C32TG (melanoma) | 85011428 | J774.2 |
| ECACC细胞库 | 88113004 | ZR-75-30 | 90112810 | HSDM1C1 | 94042254 | B16 melanoma 4A5 | 96020931 | IMR-33 | 85011429 | RAJI |
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文献和实验凹，除其边缘部分外，大部分区域只有视锥细胞而无视杆细胞，故为感光最敏锐的部分。人的视网膜约厚 0.1～ 0.5毫米，在组织学上将其分为 10层，其中主要由 4层细胞组成。由外向内依次为色素上皮细胞层、视细胞层、双极细胞层及神经节细胞层。 色素上皮细胞层：紧靠脉络膜，为一层单层上皮细胞，胞体内含有丰富的色素颗粒，并有胞突伸入至视细胞之间的间隙内。当强光照时，色素颗粒进入突起内，以保护视细胞不致接受过分强光的刺激；而当弱光时，色素颗粒退缩于细胞体内，使视细胞
"或"厉疽"，其发生由于风邪搏于血气，变化所生；或脉络之血，滞于卫分，阳气束结而成；肾中浊气混于阳，阳气收束所致，和血凝气滞等因素有关。《诸病源候论·黑痣候》谓："有黑痣者，风邪搏于血气，变化生也。夫人血气充盛，则皮肤润悦，不生疵瘕。若虚损则黑痣变生。"《外科正宗·黑子》中日："黑子，痣名也。皮肾中浊气混浊于阳，阳气收束，结成黑子，坚而不散。"这些论述表明，恶性黑色素瘤之基本病因乃在虚损的基础之上，或外邪搏于血气，或阳气束结而致血瘀气滞。瘀血结聚，乌黑肿块。瘀久化热，热毒瘀阴，则色红溃烂，流污黑血水。虚
放射状排列的肌纤维为瞳孔开大肌，受交感神经支配，收缩时使瞳孔开大。后层细胞较大，呈立方形，胞质内充满色素颗粒。 图18－5 人眼球的虹膜 HE×200 4．睫状体 睫状体（ciliary body）位于虹膜与脉络膜之间，前段肥厚并伸出放射状的睫状突，后段渐平坦，终止于锯齿缘。睫状体由睫状肌、基质与上皮组成（图18－1）。睫状肌为平滑肌，密集分布于睫状体的外2／3区域。肌纤维的排列有三种方向：外侧的纵行纤维紧靠巩膜走行，前端附
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