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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2—25℃
- 保质期:
一年
- 库存:
50
- 供应商:
泽叶生物
- 规格:
20支
英文名称:
产品规格:20支
双岐杆菌生化试验无糖对照产品用途: 用于双岐杆菌生化鉴定
1、 液体培养基:把培养基配好,液体一般5mL就装试管,50mL-100mL就装到100mL的三角瓶中,高温高压灭菌后待用。和细胞培养不一样的地方就在于,三角瓶和试管由于装了培养基要灭菌,瓶塞需要做棉塞或用膜等透气的东西封口。这些东西直接找有做过的实验室去弄点就行了,自己现做什么的也怪麻烦的。
双岐杆菌生化试验无糖对照固体培养基:在液体培养基中添加一定浓度的琼脂,一般是100mL装瓶,或者是200mL装瓶(装500mL的三角瓶),灭完菌后,在培养基温度降到一定程度,培养基还呈溶液状态的时候,就在超净台加抗生素倒平板。不过别太凉,不然琼脂就凝固成块块了。当然,灭好菌后,也可以等到要用的时候再倒平板,倒之前微波炉加热,溶解琼脂,冷却到一定温度再倒就行。(建议如果以前从来没弄过固体培养基,也找个人替你操作几次)这部分的内容,可以去找一本本科的微生物实验手册看看就行。
2、冻干粉比较好保存,所以在培养基全部准备好之前不用去管冻干粉,扔冰箱就行。都准备就绪以后,直接用500-1000uL的培养基溶解干粉,浓度高,接活率高。然后有几种方法可以选择:
1).直接将溶好的菌取5-10uL加入到5mL 液体培养基(已经加了抗性)中,37C摇床培养。根据你的冻干粉保存的时间,一般7,8个小时就能看见有没有长了。
2).为了防止接菌量太少,导致菌体不生长,可以取50-100uL的菌液加入到50mL液体培养基中,37C摇瓶培养,这个按说应该会长得比较快一点,因为通气量大。所以你可以都接上,看情况。
3).还有为了防止污染,会直接取菌液在固体培养基上划线,这样长出来的是单菌落,根据菌落大小和形态,就可以避免取到污染的菌体。但是这种方法风险最高,因为接菌量小,如果菌体活力稍弱,就容易完全不长。
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培养24小时后,在V.P.和硝酸盐分隔室内分别加入一滴V.P.反应试剂和硝酸盐反应试剂,V.P.试验需在加入反应试剂后20—30分钟时再观察结果。根据E-15实验项目的变色范围(如表X-1所示),对照E-15鉴定标色板,观察各项生化反应的变色情况,确定它们是阳性反应或阴性反应,即各项生化反应结果。 6.编码的检索方法 根据各项生化反应结果,按记录编码表的顺序,把三个生化试验编为一组,其顺序代号分别是4、2、 1三个数字,凡结果阳性者记“ ”,阴性者记“-”。15种
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