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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
室温
- 保质期:
18个月
- 英文名:
Large Plasmid Extraction Kit(for cell transfection)
- 库存:
608
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
20次
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销售,产品线涵盖大型质粒大量提取试剂盒(>10kb质粒)品牌在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:大型质粒大量提取试剂盒(>10kb质粒)品牌
品牌:百奥莱博
编号:ALH091
产地:国产|进口
规格:20次
英文名:Large Plasmid Extraction Kit(for cell transfection)
本试剂盒适用于BAC/PAC/P1/Cosmid等大型质粒制备。常规的离心柱型质粒抽提试剂盒并不适用于BAC/PAC/P1/Cosmid等大型质粒DNA的抽提。这主要是因为大型质粒DNA分子量很大,常常会超过100kb而且一般拷贝数低产量低,使用常规的离心柱吸附膜吸附效率和产量很低而且过膜会打断这些大分子量的质粒DNA。本试剂盒采用改进碱裂解法从培养菌中提取质粒DNA,采用独特的溶液配方和内毒素清除试剂,只需要几次简单离心去除蛋白质、多糖、内毒素、RNA等杂质,获得高质量的质粒DNA。纯化DNA的OD260/280通常在1.8左右,得到的质粒可直接应用于细胞转染甚至动物体内实验等对DNA纯度要求很高的工作中。纯化后期过程均在Eppendorf管中操作,方法简单,不需特殊设备,无需过柱,不用酚氯*(代"仿")抽提;基本可完全回收细菌裂解释放出的质粒,不必担心质粒DNA的丢失。本方法提取纯化质粒DNA,对质粒损伤小,即使是10kb甚至100kb以上的大型质粒或超大型BAC/PAC质粒,只要碱裂解法能够提取,就可以有效纯化。此外溶液型的试剂可以按照比例放大缩小进行小提/中提/大提,最后可选择任意小体积溶解质粒,浓度可高达3μg/μl。
试剂盒组份(20次):
RNaseA(10mg/ml)-————————1.3ml
溶液P1—————————————130ml
溶液P2—————————————100ml
溶液PⅢ-————————————110ml
杂质清除剂A-——————————3ml
杂质清除剂B-——————————30ml
内毒素清除剂——————————10ml
试剂盒特点:
1.不需要使用有毒的苯酚,氯*(代"仿")等试剂,也不需要乙醇沉淀。快速、 方便、从150-200 ml大肠杆菌LB((Luria-Bertani)培养液中,可快速提取0.4-1mg纯净的高拷贝质粒DNA,提取率达80-90 %。
2.获得的质粒产量高,超螺旋比例高,纯度好,可直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。
3.内毒素含量极低(<0.1 EU/μg DNA),可直接应用于细胞转染。
注意事项
1. 提取的质粒量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10kb 的大质粒,应加大菌体使用量,同时按比例增加P1、P2、PⅢ的用量。
2. 提取大质粒时操作动作要轻柔,应该使用剪大了开口的吸头,防止机械剪切对DNA 的损坏。
3. DNA 沉淀液沉淀离心后,可能看不到明显沉淀。如未见沉淀,担心DNA 丢失,可保留上清液,待完成全部操作后电泳鉴定,以确定是否获得终产物(数百微克DNA 离心沉淀在管的侧壁上,可能无法看到明显团块)。
4. 得到的质粒DNA 可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。OD260值为1 相当于大约50μg/ml DNA。电泳可能为单一条带,也可能为2 条或者多条DNA 条带,这主要是不同程度的超螺旋构象质粒泳动位置不一造成,与提取物培养时间长短、提取时操作剧烈程度等有关。本公司产品正常操作情况下基本超螺旋可以超过95%。
5. 质粒DNA 确切分子大小, 必须酶切线性化后,对比DNA 分子量Marker 才可以知道。处于环状或者超螺旋状态的质粒,泳动位置不确定,无法通过电泳知道确切大小。
储存条件:室温,有效期18个月。
本品别名:大型质粒大量提取试剂盒(>10kb质粒)|大型质粒提取试剂盒|大型质粒大量制备试剂盒|无内毒素大型质粒提取试剂盒|转染级质粒大量提取试剂盒|细胞转染用大型质粒制备试剂盒|BAC大型质粒提取试剂盒|PAC大型质粒提取试剂盒|P1大型质粒提取试剂盒|Cosmid大型质粒提取试剂盒
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2-硫代巴比*(代"妥")酸 Fmoc-Thr(tBu)-OH 504-17-6
PY02-115 磷酸盐葡萄糖胨水培养基 250克
BTN101112 柱式水样DNAOUT Column Water DNAOUT
9041-08-1 Heparin 肝素钠
25988-63-0 Poly-L-Lysine 多聚-L-赖氨酸(15-30万)
3-吡啶磺酸 Methyl violet 636-73-7
乙酰辅酶A三锂盐 Phenolphthalein 75520-41-1
L-异亮氨酸甲酯盐酸盐 CBZ-D-Valine 18598-74-8
诱惑红 D-Asparagine Monohydrate 25956-17-6
BTN120101 谷胱甘肽琼脂糖 Glutathione Agarose
苦酮酸 H-Leu-Ome?HCl 550-74-3
DL-精氨酸盐酸盐 DL-Lysine 32042-43-6
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大型质粒大量提取试剂盒(>10kb质粒)品牌关键词:无内毒素大型质粒提取试剂盒,大型质粒大量制备试剂盒,>10kb质粒,大型质粒大量提取试剂盒(>10kb质粒)
·细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-FITC/PI双染)
编号:ALH608
英文名称:Apoptosis detection kit (Annexin V-FITC probe)
规格:25次|50次
本试剂盒以标记了FITC的Annexin Ⅴ作为荧光探针,利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。细胞凋亡是细胞的基本特征之一,它在机体的胚胎发育、组织修复、内环境的稳定等方面起着十分重要的作用。Annexin Ⅴ是一种分子量为35-36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,能与细胞凋亡过程中翻转到膜外的磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine,PS)高亲和力特异性结合。
Propidium iodide(PI)是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,但在凋亡中晚期的细胞和死细胞,PI能够透过细胞膜而使细胞核红染。将Annexin Ⅴ与PI匹配使用,可以将凋亡早期的细胞和晚期的细胞以及死细胞区分开来。
试剂盒组份:
Annexin V-FITC(20ug/ml)————————500ul
Binding Buffer—————————————20ml
Propidium Iodide(PI)(50ug/ml)—————125ul
注意事项
1. 为保证得到理想的实验结果,在使用此试剂盒之前请认真阅读该注意事项;
2. 试剂(尤其是小瓶装的试剂)在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落;
3. Propidium iodide(PI)能通过皮肤吸收,对眼睛有刺激作用;
4. 此试剂盒仅供科研使用,不宜用于临床诊断;
5. 本试剂盒中提供的PBS 为随试剂赠送,并非试剂盒的真正组成成分;细胞的洗涤同常规方法。
储存条件:2~8℃,有效期12个月。
·TA克隆试剂盒(不含多克隆位点)(拓扑连接酶技术)
编号:ALH331
英文名称:Zero Background TOPO TA Cloning Kit(without MCS)
规格:20次|80次
本试剂盒和传统的T4连接酶原理不同,它根据用拓扑异构酶可以在瞬间(几秒钟-几分钟)、高效(接近100%)连接DNA*(代"片")段的原理,采用本公司独特的工艺制成。
试剂盒组份(20次):
TOPO-Ta Simple Vector(30ng/μl)—————20μl
1000bp Control(30ng/μl)————5μl
10×Enhancer———————————20μl
产品特点:
1. 可以在瞬间(几秒钟-几分钟)完成连接。
2. 无需冰浴和热休克,室温5分钟内完成转化;无需1小时复苏,只需37℃10分钟复苏便可以涂板。从连接到涂板只需15-20分钟。
3. 无自连、零背景,无需繁琐蓝白斑筛选,见到长出的克隆便是有插入的(接近100%)。
4. 可以连接长达10kb片段(即使连接5kb片段,挑10个菌落,至少8个是有插入的),是目前世界上最简单、最快速、零背景免筛选的TOPO TA克隆载体。
储存条件:-20℃,有效期12个月。
大型质粒大量提取试剂盒(>10kb质粒)品牌关键词:无内毒素大型质粒提取试剂盒,大型质粒大量制备试剂盒,>10kb质粒,大型质粒大量提取试剂盒(>10kb质粒)
F030704 BIOTIN标记小鼠抗HIS抗体 Monoclonal Mouse Anti-His*BIOTIN
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ARB10226 人β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)elisa检测操作说明书 Human amyloid beta Peptide 1-40,aβ1-40 ELISA KIT
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北京百莱博科技有限公司专业生产供应销售生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购大型质粒大量提取试剂盒(>10kb质粒)品牌。
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文献和实验【求助】新手 请问western-blot测NF-KB、FLT3是用总蛋白提取试剂盒吗
xungufeng820 各位大侠: 小弟是新手,师兄们也没做过的,不知western-blot测NF-KB、FLT3是用总蛋白提取试剂盒吗?急盼回复!万分感谢! snowxyh 我用过总蛋白提取试剂盒提蛋白,之后western-blot检测NF-KB,但是感觉这样得到的蛋白浓度很稀,需要比较大的上样量才能检测出来,个人感觉,还是用传统的细胞匀浆裂解,离心提取上清,这样得到的蛋白浓度大,做试验结果好
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,不能得到足够的菌量来抽提质粒,摇菌时间一般 12-14 小时为宜。 ③质粒属于低拷贝类型,导致收集的细菌量过少。 ④提取时菌量过多:容易导致裂解不充分,且容易超过硅胶膜柱的承载上限,最终使得质粒提取效率降低,建议参考提取试剂盒建议的菌液量来提取。 ⑤质粒提取实验操作不当:比如在加入缓冲液重悬菌体时,菌体没有充分分散悬浮,导致后续裂解不充分。为指示菌体是否充分裂解,可以考虑在重悬缓冲液中加入指示剂(QIAGEN 质粒提取试剂盒中均有配备 LyseBlue 指示剂),均匀蓝色指示悬浮充分。 ⑥试剂使用
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